成人做爰免费视频免费看_成人a级高清视频在线观看,成人a大片在线观看,成人a大片高清在线观看,成人av在线播放,一a一级片,一级黄 中国色 片,一级黄 色蝶 片,一级黄色 片生活片

北京百奧創新科技有限公司

慢病毒包裝

時間:2020-3-19 閱讀:2015
分享:

慢病毒(Lentivirus) 載體是以HIV-1 (人類免疫缺陷Ⅰ型病毒)為基礎發展起來的基因治療載體。區別一般的逆轉錄病毒載體,它對分裂細胞和非分裂細胞均具有感染能力。所以,在體外實驗及體內實驗的研究中,慢病毒己經成為表達外源基因或外源shRNA的常用載體形式之一, 并且正在獲得越來越廣泛的應用。

 

慢病毒(Lentivirus) 載體

 

      在細胞實驗中,對于按常規方法難以轉染甚無法轉染的細胞,通過使用病毒介導的方式能夠大大提高基因的轉導效率,達到目的基因高效表達的目的。

 

       具體來說,慢病毒包裝主要應用于以下幾個方面:

       1、對于難轉染的細胞,如原代細胞、干細胞、不分化的細胞等,能大大提高目的基因轉導效率,而且目的基因整合到宿主細胞基因組的幾率大大增加,極大地方便了RNAi,cDNA克隆以及報告基因的研究;

       2、進行穩轉細胞株的篩選;

       3、為活體動物模型實驗提供高質量的包含目的基因的病毒液;

 

慢病毒包裝應用

  

       為產生高滴度的病毒顆粒,通常需要利用慢病毒表達載體和包裝質粒同時共轉染細胞,在細胞中進行病毒的包裝。慢病毒表達載體包含了包裝、轉染、穩定整合所需要的遺傳信息,慢病毒包裝質粒可提供所有的轉錄、包裝、重組的假病毒載體所需要的所有輔助蛋白。包裝好的假病毒顆粒分泌到細胞外的培養基中。離心收集上清液后,可以直接用于宿主細胞的感染,目的基因進入到宿主細胞后,在細胞漿中被其自身攜帶的逆轉錄酶逆轉錄為DNA,形成DNA整合前復合體,進入細胞核后,DNA整合到細胞基因組中。整合后的DNA轉錄mRNA,回到細胞漿中,表達目的蛋白或產生RNAi干擾。

 

慢病毒表達載體

 

 

       慢病毒包裝實驗方法

 

 

 

 

 

        1.構建含有目的基因的慢病毒表達載體

        2.細胞準備:細胞傳代后,密度達到70%左右時進行轉染;

        3.轉染復合物制備:取兩個EP管,一個(A管)加入慢病毒載體的表達質粒、混合包裝質粒和Opti-MEMI;另一個(B管)加入Opti-MEMI、轉染試劑,一邊輕柔渦旋A管,一邊往A管滴加B管的溶液。溶液混合后,室溫放置10-25分鐘,即完成轉染復合物的制備。

        4.細胞轉染:將混合液逐滴加入細胞培養皿中,混勻后孵育;

        5.收集病毒:轉染后48h、72h收集含慢病毒的上清;

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
撥打電話 產品分類
在線留言
主站蜘蛛池模板: 国产精品麻豆一区| 亚洲色情快播| 日韩精品人妻一区二区中文| 欧美日韩理论电影在线播放| 国产免费久久精品99re丫y| 日韩在线精品强乱中文字幕| 91麻豆国产极品在线播放| 欧洲丰满大乳人妻无码欧美| 郭美美17.2g ed2k| 精品亚洲综合射精| 亚洲欧美国产∧v精品综合网| 色综合网站国产麻豆| 亚洲欧洲中文日韩久久AV乱码| 三级黄线在线播放爱情| 亚洲精品成人久久电影网| 91福利视频一区二区| 亚洲av色福利天堂| 无码激情AAAAA片-区区| 色鲁阁色婷婷色丁香| 人体内射精一区二区三区| 黑料专区 爆料| 欧美高清性xxxxxxx| 日韩中文字幕在线一区二区| 韩国电影理论一区二区| 韩漫羞羞漫画在线观看| 国产精品久久久久久一区二区| 和闺蜜69式互慰| 日韩va欧美va久久| 麻豆影视在线直播视频| 无码日本H肉黄动画片| 日韩精品电影在线| 日韩最新视频一区二区三| 深夜爽爽动态图无遮无挡| AV蜜臀在线网站| 国产欧美精品一区二区综合| 黄色日韩一级片| 在线成人网大香蕉| 欧美一区二区三区不卡在线| 国产精品久久久免费视频| 日韩精品无码一区二区免费A片| 日韩亚洲欧美综合网|