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酸性磷酸酶(ACP)測試盒可見分光光度法

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    上海市

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50管/24樣96元15 盒 可售
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更新時間:2025-03-03 13:56:32瀏覽次數(shù):492

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50管/24樣
貨號 GOY-SH295-B 應用領域 生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研研究實驗 檢測方法 可見分光光度法
產(chǎn)品類別 酯酶系列 品牌 谷研
貨期 現(xiàn)貨    
酸性磷酸酶(ACP)測試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:非洲馬瘟病毒PCR檢測試劑盒African Horse Sickness Virus(AHSV)RTPCR非洲豬瘟病毒PCR檢測試劑盒科研用African Swine Fever Virus(ASFV)PCR放線共生放線桿菌PCR檢測試劑盒Aggregatibacter actinomycetemcomitans PCR加州立克次體PCR

詳細介紹

酸性磷酸酶(ACP)測試盒可見分光光度法

酸性磷酸酶(ACP)測試盒可見分光光度法

本公司所有產(chǎn)品僅供科學實驗,不做其他科學實驗外的使用!
商品屬性:
酸性磷酸酶(ACP)測試盒可見分光光度法

貨號

GOY-SH295-B

檢測方法

可見分光光度法

規(guī)格

50管/24樣

產(chǎn)品類別

酯酶系列


測定意義:

酸性磷酸酶(ACP)測試盒可見分光光度法

ACP是一種在酸性條件下催化磷酸單酯水解稱無機磷酸的水解酶,主要存在于巨噬細胞的溶酶體內(nèi)。ACP常用于前列腺癌的輔助診斷。

測定原理

在酸性環(huán)境中,ACP催化磷酸苯二鈉水解生成苯和磷酸二鈉,苯與4-氨基安替林反應生成色素原,該色素原經(jīng)鐵氰化氧化生成紅色亞醌衍生物,在510nm有特征光吸收。

需自備的儀器和用品

酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、酶標板、蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液一:液體 100mL×1 瓶,4℃保存。

提取液二:液體 100mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:粉劑×1 瓶,-20℃保存;

試劑二:液體 20mL×1 瓶,4℃保存;

試劑三:液體 14uL×1 支,4℃保存;

組織樣本的前處

①總 GAPDH 酶提取:建議稱取約 0.1g 樣本,加入 1mL 提取液一,冰浴勻漿后超聲破碎(冰浴,200W,破碎 3s,間歇 7s,總時間 1min),然后 4℃,8000g 離心 10min,取上清測定。

②胞漿和葉綠體 GAPDH 酶的分離:按照植物組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10的比例(建議稱取約 0.1g 樣本,加入 1mL 提取液一),冰浴勻漿后于 4℃,200g 離心 5min,棄沉淀,取上清4℃,8000g 離心 10min,取上清用于測定胞漿 GAPDH 酶活性,取沉淀加 1mL 提取液二,震蕩溶解后超聲破碎(冰浴,200W,破碎 3s,間歇 7s,總時間 1min),然后 4℃,8000g 離心 10min,取清測定葉綠體中 GAPDH 酶活性。建議測定總 GAPDH 酶活性,按照步驟①提取粗酶液,若需要分別測定胞漿和葉綠體中的GAPDH,則按照步驟②提取粗酶液。細菌或培養(yǎng)細胞的前處理先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量(104個):提取液一體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液一),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

酸性磷酸酶(ACP)測試盒可見分光光度法

測定步驟:
酸性磷酸酶(ACP)測試盒可見分光光度法

1、 分光光度計或酶標儀預熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長至 340nm,蒸餾水調(diào)零。

2、 樣本測定

(1)工作液的配制:將試劑二全部倒入試劑一瓶中,充分溶解,37℃(哺乳動物)或 25℃(其它物種)預熱 10 分鐘;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

(2)在試劑三中加入 500μL 蒸餾水,充分混勻待用;用不完的試劑分裝后-20℃保存,禁止反復凍融。

(3)在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 5μL 樣本、5μL 試劑三和 190μL 工作液,混勻,加入最后一個試劑的同時開始計時,記錄 340nm 處 20s 時的吸光值 A1 和 5min20s 后的吸光值 A2,計算 ΔA=A1-A2。

GAPDH 活性計算

a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下

(1)按樣本蛋白濃度計算

單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T=1286×ΔA÷Cpr

(2)按樣本鮮重計算

單位的定義:每 g 組織每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V 樣÷V 樣總) ÷T=1286×ΔA÷W

(3)按細菌或細胞密度計算

單位的定義:每一萬個細菌或細胞每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min/104cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500 ×V 樣÷V 樣總) ÷T=2.572×ΔA

V 反總:反應體系總體積,2×10-4L;ε:NADH 摩爾消光系數(shù),6.22×103L / mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V 樣:加入樣本體積,0.005 mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細菌或細胞總數(shù),500 萬。

b.用 96 孔板測定的計算公式如下

(1)按樣本蛋白濃度計算

單位的定義:每 mg 組織蛋白每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T=2572×ΔA÷Cpr

(2)按樣本鮮重計算

單位的定義:每 g 組織每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(W ×V 樣÷V 樣總) ÷T=2572×ΔA÷W

(3)按細菌或細胞密度計算

單位的定義:每一萬個細菌或細胞每分鐘消耗 1 nmol 的 NADH 定義為一個酶活力單位。GAPDH(nmol/min/104cell)=[ΔA×V 反總÷(ε×d)×109]÷(500 ×V 樣÷V 樣總) ÷T=5.144×ΔA

V 反總:反應體系總體積,2×10-4L;ε:NADH 摩爾消光系數(shù),6.22×103L / mol /cm;d:96 孔板光徑,0.5cm;V 樣:加入樣本體積,0.005 mL;V 樣總:加入提取液體積,1 mL;T:反應時間,5 min;Cpr:樣本蛋白質(zhì)濃度,mg/mL;W:樣本質(zhì)量,g;500:細菌或細胞總數(shù),500 萬。

生化試劑盒的使用注意事項:
酸性磷酸酶(ACP)測試盒可見分光光度法

選擇合適的試劑盒:根據(jù)實驗目的和檢測對象選擇合適的試劑盒,確保實驗的準確性和可靠性。

嚴格遵循說明書:按照試劑盒的說明書進行操作,避免誤用或浪費。

注意保存條件:按照試劑盒的保存條件進行妥善保存,避免陽光直射、高溫或潮濕等不利因素。

控制實驗條件:在實驗過程中嚴格控制實驗條件,如溫度、時間、pH值等,以確保實驗結果的穩(wěn)定性。

公司正在出售的產(chǎn)品:
酸性磷酸酶(ACP)測試盒可見分光光度法

尿酸(UA)含量測試盒可見分光光度法

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牛結合珠蛋白ELISA試劑盒

糖原合成酶(GCS)測試盒

牛金屬硫蛋白ELISA試劑盒

糖原磷酸化酶a(GPa)測試盒

牛酪蛋白κELISA試劑盒

糖原磷酸化酶b(GPb)測試盒

牛磷SUAN果糖激ELISA試劑盒

天冬酰胺合成酶(AS)測試盒

牛卵泡抑素ELISA試劑盒

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銅藍蛋白(Cp)含量測試盒

牛免疫球蛋白GELISA試劑盒

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牛免疫球蛋白MELISA試劑盒

訂購流程:
酸性磷酸酶(ACP)測試盒可見分光光度法

1、訂購前,請與銷售員核對產(chǎn)品中文名稱/CAS號/英文名稱等。

2、我司大部分產(chǎn)品都是現(xiàn)貨,產(chǎn)品核實好下單后即可當天發(fā)貨。(庫存信息以當日為準)如有特殊要求請在發(fā)貨前與銷售員聯(lián)系。

3、我司產(chǎn)品支持款到發(fā)貨、快遞代收尾款、網(wǎng)上現(xiàn)拍等付款方式。

4、質(zhì)量保證,嚴格把關,如有產(chǎn)品異議經(jīng)公司鑒定確認后可包換包退,免除客戶后顧之憂。

5、我司提供完善的售后服務,使用過程中如有任何疑問,可提供技術指導。


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