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兔原代卵巢顆粒細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基

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具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100mL/500mL
貨號(hào) GOY-XP3108 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅用于科研    
兔原代卵巢顆粒細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品:9204細(xì)胞,人肝癌細(xì)胞 大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞,RBL-2H3細(xì)胞 山羊腎上皮樣細(xì)胞;DG-K1 Calu-3(人肺腺癌細(xì)胞) rCSC, 大鼠心肌細(xì)胞 [CIP 104328;IAM 13570;ICMP 5794;NCPPB 2991]細(xì)胞 HBL-100(整合SV40 基因的上皮細(xì)胞) 豬原代輸尿管成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基

詳細(xì)介紹

兔原代卵巢顆粒細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基

兔原代卵巢顆粒細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基

兔原代卵巢顆粒細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基

產(chǎn)品分類(lèi)

原代細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基

規(guī)格

100mL/500mL

貨號(hào)

GOY-XP3108

兔原代卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持兔原代卵巢顆粒細(xì)胞最佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含兔原代卵巢顆粒細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于兔原代卵巢顆粒細(xì)胞的培養(yǎng)。

名稱(chēng)

體積

濃度

保存條件

原代卵巢顆粒細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基

500ml

1×

4℃、避光

原代卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)添加劑

5ml

100×

-20℃、避光

胎牛血清(FBS

50ml

終濃度10%

-20℃、避光

 

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì),請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部;這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低,如有接觸,立即用自來(lái)水沖洗即可。

兔原代卵巢顆粒細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基


儀器試劑耗材
離心機(jī)胎牛血清(FBS)離心管(15ml、50ml)
生物安全柜無(wú)菌 1×PBS pH=7.2T-25 細(xì)胞培養(yǎng)瓶
電動(dòng)移液器0.25%+0.02%EDTA一次性無(wú)菌移液管(2ml、5ml、10ml)
CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)基(含血清)1.8mL 凍存管
倒置顯微鏡凍存液:90%FBS+10%DMSO程序降溫盒




兔原代卵巢顆粒細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃;

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管,加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基,放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱;

3) 戴上護(hù)目鏡,厚毛線手套后,從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞,盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動(dòng)凍存管以提高復(fù)溫速率;

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中,混勻后,1000rpm 離心 5min;

5) 準(zhǔn)備一個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,寫(xiě)上細(xì)胞名稱(chēng)、日期,再加入 4ml 培養(yǎng)基;

6) 離心完成后棄去上清,用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后,轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中,混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 (細(xì)胞傳代建議一傳二)

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時(shí),可進(jìn)行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi),打開(kāi)培養(yǎng)瓶瓶口,收集瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基;

3) 向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入 3ml 無(wú)菌的 1×PBS 后,水平放置培養(yǎng)瓶,使PBS 能夠浸潤(rùn)到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積,吸棄 PBS;

4) 向瓶?jī)?nèi)加入消化液 1ml,浸潤(rùn)底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min;

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起,若全部消化下來(lái)則直接向培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中,將懸液吸入 15ml 離心管;

① 準(zhǔn)備一個(gè)無(wú)菌的 15ml 離心管,加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基;

② 將消化下來(lái)的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和(避免吹打③);向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右,輕拍培養(yǎng)瓶,95%左右細(xì)胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min;

7) 準(zhǔn)備兩個(gè)新的 T-25 培養(yǎng)瓶,各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后,棄上清,用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞,將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶,每個(gè)培養(yǎng)瓶各 1ml;

9) 水平放置培養(yǎng)瓶,震蕩混勻后,將培養(yǎng)瓶置于 37℃,5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。 

兔原代卵巢顆粒細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基

凍存 (細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支)

1)~6)參照傳代步驟

7)離心完成后,棄上清,用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀,然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中;

8)將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿(mǎn)異丙醇的程序降溫盒中,之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過(guò)夜降溫;

9)第二天,取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管,盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。

兔原代卵巢顆粒細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基

?無(wú)菌操作?:細(xì)胞培養(yǎng)需在無(wú)菌環(huán)境下進(jìn)行,使用前需對(duì)超凈工作臺(tái)進(jìn)行紫外線照射滅菌,定期清潔培養(yǎng)箱。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服、鞋套,戴口罩、手套。

?器材滅菌?:玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌,塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購(gòu)買(mǎi)已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?:所用培養(yǎng)液、血清、緩沖液等試劑應(yīng)無(wú)菌、無(wú)污染,使用前需進(jìn)行無(wú)菌檢測(cè)。不同細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)液成分要求有差異,應(yīng)按細(xì)胞類(lèi)型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?:多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃,偏差應(yīng)控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性,定期檢查氣體濃度與流量,細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右。

?日常觀察?:每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)、生長(zhǎng)狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測(cè)?:定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行支原體、細(xì)菌、真菌等污染檢測(cè)。

兔原代卵巢顆粒細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基

ER-Alpha peptide 雌激素受體(多肽抗原 0.5mgER-Alpha peptide 雌激素受體(多肽抗原)

ADAM15 Protein Human 重組人 ADAM15 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CD164重組大鼠 CD164 / Endolyn 蛋白  Protein

ADIPOQ Protein Mouse 重組小鼠 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白 (His 標(biāo)簽)

PRSS27重組人 Pancreasin / Marapsin / PRSS27 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

小鼠血小板膜糖蛋白Ⅱba(GP-ba/CD41+CD61)ELISA 試劑盒

Rat apoptosis inducing factor (AIF) ELISA Kit 大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)試劑盒

Humanα-L-iduronidase,IDUAELISAKit 人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor(MouseGasoiestinalcancerMarker-CA199)ELISAKit小鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199

飲料乙酸激酶法定量試劑盒20

MouseIerleukin6,IL-6ELISAKit小鼠白介素6(IL-6)試劑盒

植物草酸氧化酶(OxO)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

植物25羥基D3(25(OH)D3/25HVD3)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

魚(yú)脫酶3DIO3ELISA試劑盒     ELISA   組裝/原裝

魚(yú)脫酶2DIO2ELISA試劑盒     ELISA   組裝/原裝

植物E(VE)ELISA 試劑盒

Human liver specific lipoprotein aibody (LSP) ELISA Kit 人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)試劑盒

PorcineCoicosterone,COELISAKit 豬皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAFP-L1(Humanalpha-fetoproteinLensculinarisaggliin1)ELISAKit人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1

血液D比色法定量試劑盒20

MouseThromboxaneB2,TXB2ELISAKit小鼠血栓素B2(TXB2)試劑盒

抑癌基因p16/p14/P19抗體

RHOA單克隆抗體

兔原代卵巢顆粒細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基CD164重組大鼠 CD164 / Endolyn 蛋白  Protein

ER-Alpha peptide 雌激素受體(多肽抗原 0.5mgER-Alpha peptide 雌激素受體(多肽抗原)

PRSS27重組人 Pancreasin / Marapsin / PRSS27 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ADAM15 Protein Human 重組人 ADAM15 蛋白 (His 標(biāo)簽)

ADIPOQ Protein Mouse 重組小鼠 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白 (His 標(biāo)簽)


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