化工儀器網
詳細介紹
產品屬性：
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 臍動脈平滑肌細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X0979 |
商品介紹：
名稱 臍動脈平滑肌細胞 2.組織來源：臍帶組織 3.產品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 人臍動脈平滑肌細胞分離自臍帶組織；它是臍動脈的重要結構組成細胞之一，在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結構，臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈，卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中，子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管，與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近，在此處母體和胎兒的血液間進行CO2和O2，代謝產物即代謝廢物和營養(yǎng)物質的交換。臍動脈將胎兒產生的廢物運送至胎盤，臍靜脈將O2和營養(yǎng)物質從胎盤運送給胎兒。由于臍帶是分娩過程中的廢棄物，同時從臍帶中分離臍靜動平滑肌細胞方法相對成熟，使得體外培養(yǎng)的臍動脈平滑肌細胞作為研究血管的模型細胞。臍動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。 5.方法簡介： 實驗室分離的人臍動脈平滑肌細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的人臍動脈平滑肌細胞經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產品貨號CM-H085 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)成纖維細胞樣 傳代特性可傳5代左右；3代以內狀態(tài)最佳 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃，并經過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大小；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
大鼠 TF 基因全長ORF克隆
大鼠 NET1 基因全長ORF克隆
大鼠 ARFGAP3 基因全長ORF克隆
大鼠 AK1 基因全長ORF克隆
大鼠 THTPA 基因全長ORF克隆
大鼠 EHD2 基因全長ORF克隆
大鼠 ALDH9A1 基因全長ORF克隆
大鼠 MRPL45 基因全長ORF克隆
大鼠 ENO1 基因全長ORF克隆
大鼠 PNPLA3 基因全長ORF克隆
臍動脈平滑肌細胞0.78-50 ng/mL 人水通道蛋白2(AQP-2)ELISA試劑盒
15.6-1000 pg/mL 人芳香基硫酸酯D(ASD)ELISA試劑盒
7.8-500 ng/mL ELISA Kit for Human Protein S100-A6
0.312-20 ng/mL 人內源性波納病毒樣核蛋白1(EBLN1)ELISA試劑盒
1.56-100 ng/mL 人激肽原1(KNG1)ELISA試劑盒
0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human IgG receptor FcRn large subunit p51
3.12-200 ng/mL ELISA Kit for Human Plasminogen
0.4mg無菌硫代水溶液 英文名稱： 產品規(guī)格：0.4mg/支*20
3%氯化鈉堿性蛋白胨水顆粒 英文名稱：3%NaCl Alkaline Peptone Water 產品規(guī)格：225ml/袋*10
0.312-20 ng/mL 人鉀/鈉超極化激活環(huán)核苷酸門控通道蛋白4(HCN4)ELISA試劑盒
化工儀器網