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HFF (包皮成纖維細(xì)胞)

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更新時(shí)間:2025-02-28 07:24:50瀏覽次數(shù):255

聯(lián)系我們時(shí)請(qǐng)說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào) GOY-01X0611 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
HFF (包皮成纖維細(xì)胞)的相關(guān)*:細(xì)胞可溶性總蛋白制備試劑盒 20次
組織可溶性總蛋白制備試劑盒 20次
植物組織可溶性總蛋白粗提制備試劑盒 20次
植物組織可溶性總蛋白*制備試劑盒 20次
植物組織可溶性疏水總蛋白制備試劑盒 20次
植物組織可溶性親水總蛋白制備試劑盒 20次

詳細(xì)介紹

冷凍保存細(xì)胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲(chǔ)存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過1 小時(shí), 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

QQ截圖20210907103850.png

產(chǎn)品屬性:   

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號(hào)

HFF (包皮成纖維細(xì)胞)

1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0611

商品介紹:

名稱    HFF (包皮成纖維細(xì)胞)   

年齡(性別)男

生長特性貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài)成纖維細(xì)胞樣

生物安全等級(jí)1

生長培養(yǎng)基DMEM10% FBS1% P/S

推薦傳代比例0.0430555555555555

推薦換液頻率2~3/

凍存條件

凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%CO25%

溫度:37℃

 

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;

5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 UCN2 基因全長ORF克隆

 PIANP / C12ORF53 基因全長ORF克隆

 KRT17 基因全長ORF克隆

 CALD1 基因全長ORF克隆

 CALCA 基因全長ORF克隆

 TMED3 基因全長ORF克隆

 PDGFD 基因全長ORF克隆

 CMTM7 基因全長ORF克隆

 FAM176B 基因全長ORF克隆

 BRSK1 基因全長ORF克隆

HFF (包皮成纖維細(xì)胞)0.312-20 ng/mL 人Sal樣蛋白2(SALL2)ELISA試劑盒

乳糖發(fā)酵管(軍團(tuán)菌) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支

0.312-20 ng/mL 人單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mL 人母體胚胎拉鏈激(MELK)ELISA試劑盒

31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Thyrotropin receptor

0.156-10 ng/mL 人鱗狀細(xì)胞癌抗原2ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human DNA-(apurinic or apyrimidinic site) lyase

0.156-10 ng/mL 人基質(zhì)金屬蛋白28(MMP-28)ELISA試劑盒

78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Reversion-inducing cysteine-rich protein with Kazal motifs

0.156-10 ng/mL 人配對(duì)免疫球蛋白樣2型受體β(PILRB)ELISA試劑盒

 


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