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臍靜脈血來源內(nèi)皮祖細胞

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更新時間:2025-02-26 13:12:23瀏覽次數(shù):323

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X1181 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
臍靜脈血來源內(nèi)皮祖細胞的相關(guān)*:10倍酵母SD-HIS培養(yǎng)基 100毫升
酵母SD-URA培養(yǎng)基 100毫升
10倍酵母SD-URA培養(yǎng)基 100毫升
酵母SD-URA培養(yǎng)基(半乳糖) 100毫升
10倍酵母SD-URA培養(yǎng)基(半乳糖) 100毫升
酵母SD-URA培養(yǎng)基(半乳糖+棉籽糖) 100毫升

詳細介紹

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

產(chǎn)品屬性:  

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

臍靜脈血來源內(nèi)皮祖細胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X1181

商品介紹:

名稱    臍靜脈血來源內(nèi)皮祖細胞  

2.組織來源:臍帶血

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介:

臍靜脈血來源內(nèi)皮祖細胞分離自臍靜脈血;內(nèi)皮祖細胞是血管內(nèi)皮細胞的前體細胞,亦稱為成血管細胞(Angioblast),是一群具有游走特性,能進一步增殖分化的幼稚內(nèi)皮細胞,缺乏成熟內(nèi)皮細胞的特征性表型,不能形成管腔樣結(jié)構(gòu),其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發(fā)生和血管損傷后的修復(fù)。研究顯示,內(nèi)皮祖細胞在心腦血管疾病、外周血管疾病、腫瘤血管形成及創(chuàng)傷愈合等方面均發(fā)揮重要作用,并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路,EPCs生物學(xué)特性和治療作用的研究成為這一領(lǐng)域新的熱點。

5.方法簡介:

實驗室分離的人臍靜脈血來源內(nèi)皮祖細胞采用密度梯度離心、差速貼壁法結(jié)合內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的人臍靜脈血來源內(nèi)皮祖細胞經(jīng)CD34免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

包被條件PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產(chǎn)品貨號CM-H164

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)內(nèi)皮細胞樣

傳代特性可傳1-2代;不建議多次傳代

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%CO25%

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

小鼠 Neuropilin-1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

小鼠 IL6ST 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶HA標簽

 MSLN 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

 TNFSF11 / CD254 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化)(表達載體), 帶FLAG標簽

 GPNMB 轉(zhuǎn)錄變體2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

 LRPAP1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽

 IL2Rb / CD122 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶Myc標簽

 CD140b / PDGFRb 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

 ErbB3 / HER3 轉(zhuǎn)錄變體1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

 glypican 3 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽

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