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CT26.WT (小鼠結腸癌細胞)

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更新時間:2025-02-26 12:45:28瀏覽次數:386

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 1×10?cells/T25培養瓶
貨號 GOY-01X0071 應用領域 化工
主要用途 產品僅供科研使用    
CT26.WT (小鼠結腸癌細胞)的相關*:Bosc23 包裝細胞克隆選擇培養基 500毫升
PA317包裝細胞克隆選擇培養基 500毫升
重組逆轉錄病毒穩態表達細胞克隆凍存試劑盒 50次
重組腺病毒構建試劑盒 1套
重組腺病毒包裝試劑盒 1套
通用腺病毒骨架載體(pAdEasy-1) 500納克
通用腺病毒穿梭載體 5微克
腺病毒GFP穿梭載體 5微克
腺病毒LacZ穿梭載

詳細介紹

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

產品屬性:   

產品名稱

規格

貨號

CT26.WT (小鼠結腸癌細胞)

1×10?cells/T25培養瓶

GOY-01X0071

商品介紹:

名稱    CT26.WT (小鼠結腸癌細胞)   

別稱CT26WT

種屬小鼠

年齡(性別)不詳

組織來源器官:結腸;品系:BALB/c;疾病:癌

生長特性貼壁細胞

細胞形態成纖維細胞樣

背景描述CT26細胞是以N-亞硝基-N-甲基氨基甲酸酯(NNMU)誘導形成的未分化結腸癌細胞株,它克隆形成的細胞株命名為CT26.WT。用包含編碼典型腫瘤相關抗原(TAA)β-半乳糖苷酶(β-gal)lacZ基因的逆轉錄病毒載體LXSN穩定轉染CT26.WT細胞,得到致死的亞克隆CT26.CL25。即使CT26.CL25細胞表達了典型的TAA-β-半乳糖苷酶,在正常小鼠中CT26.CL25細胞和CT26.WT細胞的生長率與致死率也保持基本一致。CT26.WT細胞與CT26.CL25細胞一起可用作測試程序的模型,并用于研究宿主免疫反應。

生物安全等級1

生長培養基RPMI-164010% FBS1% P/S

推薦傳代比例1:3-1:4

推薦換液頻率2~3/

凍存條件

凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO

溫度:液氮

培養條件

氣相:空氣,95%CO25%

溫度:37℃

致瘤性Yes, in BALB/c mice. Mice inoculated, subcutaneously, developed lethal tumors at 80% frequency with 1×10^3 cells and at 100% with 1×10^4 cells. Pulmonary metastases developed when mice were inoculated, intravenously, with 1×10^4 cells.

抗原表達情況H-2d

 

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

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1瓶 EAC細胞株 EAC 低溫運輸和保存

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