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肺大靜脈內(nèi)皮細胞

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更新時間:2025-02-25 13:38:46瀏覽次數(shù):273

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號 GOY-01X0691 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 產(chǎn)品僅供科研使用    
肺大靜脈內(nèi)皮細胞的相關(guān)*:石蠟切片免疫組織化學(xué)AP聯(lián)NBT/BCIP*間接檢測試劑盒 10次
(含一抗和AP二抗)
石蠟切片免疫組織化學(xué)AP聯(lián)NBT/BCIP直接檢測試劑盒(含AP一抗) 10次
石蠟切片免疫熒光顯微鏡基礎(chǔ)檢測試劑盒(無一抗和二抗) 50次
石蠟切片免疫熒光顯微鏡間接檢測試劑盒(含熒光二抗) 20次
石蠟切片免疫熒光顯微鏡*間接檢測試劑盒(含一抗和熒光二抗)

詳細介紹

產(chǎn)品屬性: 

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

肺大靜脈內(nèi)皮細胞

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

GOY-01X0691

商品介紹:

名稱    肺大靜脈內(nèi)皮細胞 

2.組織來源:肺靜脈組織

3.產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4.細胞簡介:

肺大靜脈內(nèi)皮細胞分離自肺大靜脈組織;肺大靜脈在用肺呼吸的脊椎動物中,把動脈血由肺送回心臟的靜脈,是一個靜脈里流動脈血的血管。左右1對,共4條,兩條連接右肺,兩條連接左肺。肺靜脈異位引流是指肺靜脈未能直接與左心房連接,而與右心房或體靜脈系統(tǒng)連接的先天性心血管異位。肺靜脈淤血性肺動脈高壓,是由于肺靜脈內(nèi)血液淤滯而引起的肺動脈高壓。正常情況下,肺循環(huán)具有血壓低、阻力小和順應(yīng)性大的特點,肺動脈壓力高低取決于單位時間內(nèi)肺動脈血流量和肺血管的阻力,要維持肺循環(huán)的低壓、低阻的狀態(tài),必須保證整個肺循環(huán)系統(tǒng)的暢通無阻,血液順利地由肺動脈經(jīng)毛細血管進入肺靜脈,再入左心室,經(jīng)過左心室收縮進入體循環(huán),才能避免肺動脈內(nèi)壓力升高。細胞呈多邊形鵝卵石狀排列;該細胞在維持血管內(nèi)外的動態(tài)平衡、合成和分泌細胞因子和介質(zhì)、維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡中起重要作用。

5.方法簡介:

實驗室分離的人肺大靜脈內(nèi)皮細胞采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的人肺大靜脈內(nèi)皮細胞經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

包被條件PLL0.1mg/ml),明膠(0.1%

培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

產(chǎn)品貨號CM-H004

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態(tài)內(nèi)皮細胞樣

傳代特性可傳2-3

消化液0.25%胰蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相:空氣,95%;CO2,5%

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

 AMD1 基因全長ORF克隆

 ADD2 基因全長ORF克隆

 OLFM1 基因全長ORF克隆

 CD97 基因全長ORF克隆

 CTNNB1 基因全長ORF克隆

 GPA33 基因全長ORF克隆

 PEA15 基因全長ORF克隆

 SULT1E1 基因全長ORF克隆

 PON2 基因全長ORF克隆

 CD63 基因全長ORF克隆

肺大靜脈內(nèi)皮細胞31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Mouse C-X-C motif chemokine 15

78-5000 pg/mL ELISA Kit for Human Segment polarity protein dishevelled homolog DVL-1

78-5000 pg/mL 人肽過氧化物2(GPx-2)ELISA試劑盒

改良Skirrow氏瓊脂基礎(chǔ) 英文名稱:Skirrow Agar Base ,Modified 產(chǎn)品規(guī)格:250g

0.156-10 ng/mL 偽狂犬病毒(PRV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

31.2-2000 pg/ml 人(trypsin)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Serpin A12

30%葡萄糖溶液(PH6.5±0.5) 英文名稱:30% Dextrose Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g

0.625-40 ng/mL 人肌動蛋白抑制蛋白2(PFN2)ELISA試劑盒

0.156-10 ng/mL 人補體1q(C1q)ELISA試劑盒

 


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