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大鼠神經小膠質細胞

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更新時間:2025-02-16 20:22:58瀏覽次數:318

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 5×10?Cells/T25培養瓶
貨號 GOY-01X1037 應用領域 化工
主要用途 產品僅供科研使用    
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詳細介紹

產品屬性: 

產品名稱

規格

貨號

大鼠神經小膠質細胞

5×10?Cells/T25培養瓶

GOY-01X1037

商品介紹:

名稱    大鼠神經小膠質細胞 

2.組織來源:腦組織

3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介:

大鼠神經小膠質細胞分離自腦組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(灰質)覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經元胞體集中的地方。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面,即外側面(約占整個皮質面積的1/3)、內側面和底面(2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。小膠質細胞是神經膠質細胞的一種,相當于腦和脊髓中的巨噬細胞,是中樞神經系統(CNS)中的第一道也是最主要的一道免疫防線。小膠質細胞大約占大腦中的神經膠質細胞的20%,小膠質細胞不停地清除著中樞神經系統中的損壞的神經,斑塊及感染性物質。無數臨床上和理學研究表明激活的小膠質細胞在神經退化類疾病的發病機理中起到十分重要的作用,如帕金森病、多發性硬化和阿茲海默癥等。但是過多激活或失控的小膠質細胞會引起神經毒性。它們是促炎因子和氧化應激的重要來源,如腫瘤壞死因子(TNF),一氧化氮,白介素等有神經毒性的物質。神經小膠質細胞的主要功能:神經膠質出現在大腦發育早期向成熟階段轉化的過程中;當程序性細胞死亡時,或在大腦發育的過程中,中樞神經系統受損或受到病理損壞時,神經膠質可做為大腦的巨噬細胞;膠質細胞能在類組織相容性復合體表達CD-4陽性T細胞時表達抗原,能進行Fc介導的巨噬作用,并且與造血細胞和巨噬細胞組織共享抗原。

5.方法簡介:

實驗室分離的大鼠神經小膠質細胞采用酶消化法結合差速貼壁法,在培養基營養缺失數天后經搖床震蕩收集脫落細胞制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的大鼠神經小膠質細胞CD11b免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息:

培養基含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

產品貨號CM-R110

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細胞形態梭形、多角形

傳代特性屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群

培養條件氣相:空氣,95%CO25%

冷凍保存細胞之方法?

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。

冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

88.jpg

實驗要點及說明:

1.本方法適用于貼壁細胞培養,而不適用于懸浮細胞培養,懸浮細胞可使用滴片法;

2.所使用的蓋玻片應該為優質玻璃,并經過鉻酸洗液處理;

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;

4.如果需要更多生長狀態一致的細胞,可以使用較大的培養皿,但不宜過大,以避免培養液的浪費和增加污染機率;

5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

實驗報告:

一、分離與培養:

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

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大鼠神經小膠質細胞麥康凱瓊脂培養基(2015藥典) 英文名稱:Maconkey Agar 產品規格:250g

15.6-1000 pg/mL 轉基因植物Bar基因核酸檢測試劑盒

31.2-2000 pg/mL 人膠質細胞系來源的神經營養因子(GDNF)ELISA試劑盒

0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human Beta-2-glycoprotein 1

0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human Keratin, type I cytoskeletal 19

0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human BPI fold-containing family A member 2

T1N0肉湯 英文名稱:TIN0 Broth 產品規格:250g

31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Interleukin-4

季銨鹽類中和劑管(帶棉簽) 英文名稱: 產品規格:10ml*20

0.156-10 ng/mL 人膜鐵轉運蛋白(FPN)ELISA試劑盒

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