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馬皰疹病毒1型PCR檢測試劑盒實驗原理

閱讀:125          發布時間:2021-4-9
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馬皰疹病毒1型PCR檢測試劑盒說明書

本產品是即用型PCR試劑盒的改良產品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應,具有廣泛的用途。
1. 方便,用戶只需準備模板和引物既可以進行PCR 實驗。
2. 快捷,操作步驟已經限度地簡化,能減少污染,降低實驗誤差。
3. 本產品A 型含電泳染料,PCR 反應液可直接上樣電泳,進一步簡化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經過精心優化,反應的靈敏度高,特異性強。能擴增各種常見的DNA 樣品。
5. 產物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應。
使用及效果:將本產品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進行PCR反應(PCR 參數由用戶自己確定),反應結束后直接取10 μL 電泳檢查擴增結果。
技術特點:
1、準確可靠,臨床雙盲對照試驗>1000例,結果與金標準測序法比對,結果一致性大于99%。
2、高靈敏:可檢測低至10ng的人基因組DNA。
3、快速:整個檢測流程只需3小時。
4、簡便:試劑盒提供預混好的試劑,使體系配置操作簡便。
5、防污染
6、高特異性:雙重特異性組成,保證檢測結果的特異性和準確性引物與DNA互補鏈結合必需*配對,才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產物配對,在延伸中產生熒光。
馬皰疹病毒1型PCR檢測試劑盒組成及試劑配制:
1、 酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器(2 µL、20
µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
具有下列特點:
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速。
2. 引物經過優化,特異性強。預期的 PCR 產物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗結果。
準備物品:
清理液(A)                                   毫升
染色液(t B)                                   微升
稀釋液(C)                                   毫升
溶解液(tD)                                   毫升
產品說明書                                   1份
操作方法:
1產品名稱直接測定
2測定準備
3背景對照測定
4樣品活性測定
5計算樣品活性
馬皰疹病毒1型PCR檢測試劑盒備注:
1.本產品為50次操作
2.操作時,須戴手套
3.操作時,避免污染母液
4.即刻進行熒光檢測分析 
5.本產品染色劑不易洗掉,染色持久
6.本公司提供系列試劑產品
馬皰疹病毒1型PCR檢測試劑盒注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
運輸及保存:低溫運輸、-20℃保存,有效期一年。

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