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雞煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸ELISA試劑盒操作步驟

閱讀:238          發布時間:2023-4-19

雞煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸ELISA試劑盒操作步驟:


1. 標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標準品100μl,然后在di一、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。

11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘。

硫氧還蛋白氧化還原酶(TrxR)測試盒可見分光光度法50管/48樣

γ-谷氨酰半胱氨酸連接酶(GCL)測試盒可見分光光度法50管/48樣

γ-谷氨酰轉肽酶(γ-GT)活性測試盒可見分光光度法50管/48樣

抗壞血酸(AsA)含量測試盒紫外分光光度法50管/48樣

脫氫抗壞血酸(DHA)含量測試盒紫外分光光度法50管/48樣

L-半乳糖苷-1,4-內酯脫氫酶(Gal LDH)測試盒可見分光光度法50管/48樣

抗壞血酸氧化酶(AAO)活性測試盒可見分光光度法50管/48樣

抗壞血酸過氧化物酶(APX)測試盒紫外分光光度法50管/48樣

單脫氫抗壞血酸還原酶(MDHAR)測試盒紫外分光光度法50管/48樣

脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)活性測試盒紫外分光光度法50管/48樣

過氧化氫(H2O2)測試盒可見分光光度法50管/48樣

丙二醛(MDA)測試盒可見分光光度法50管/48樣

葡萄糖氧化酶(GOD)測試盒可見分光光度法50管/48樣

多酚氧化酶(PPO)測試盒可見分光光度法50管/24樣

蛋白質羰基測試盒紫外分光光度法50管/24樣

二胺氧化酶測試盒可見分光光度法50管/24樣

超氧陰離子測試盒可見分光光度法50管/24樣

超氧化物歧化酶(SOD)測試盒可見分光光度法50管/48樣


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