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技術(shù)文章

elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書實(shí)驗(yàn)中造成假陽性的原因

閱讀:881          發(fā)布時(shí)間:2018-4-12

1加樣
對于間接elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書標(biāo)本一般都要進(jìn)行稀釋,如果加樣不準(zhǔn)就會造成誤差,尤其當(dāng)稀釋倍數(shù)大時(shí),很小的誤差,會導(dǎo)致較大的相對誤差,使陰性(或弱陽性)標(biāo)本呈陽性(或陰性)。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡。目前,大部分血站都已使用全自動酶免加樣系統(tǒng)處理標(biāo)本,可較好地避免以上誤差
2洗滌
在ELISA中正確的洗滌是保證得到可重復(fù)結(jié)果的關(guān)健一步,應(yīng)引起操作者重視。無論是手工操作還是機(jī)器操作,得出不正確的結(jié)果常與不正確的洗滌有關(guān),ELISA就是靠洗滌來達(dá)到分離游離和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過洗滌以消除殘留在板孔中沒能與固體抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì),以及在反應(yīng)過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
3 溫育
每種elisa酶聯(lián)免疫試劑盒說明書試劑都有其*反應(yīng)模式,其中溫度和溫育時(shí)間控制是重要因素。因孵育溫度高,反應(yīng)時(shí)間長,會造成整板本底高,陽性率高。溫育一般用濕盒或水浴 ,反應(yīng)板不宜疊放,以保證各板溫度都能迅速平衡,為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋。
146501-37-3    Complanatoside A    10mg/支    沙苑子苷A
1617-53-4    Amentoflavone    20mg/支    穗花杉雙黃酮
82508-31-4    Pseudolaric Acid B    20mg/支    土荊皮乙酸
23599-69-1    Norisoboldine    10mg/支    去甲異波爾定
24697-74-3    Leonurine hydrochloride    20mg/支    鹽酸益母草堿
472-11-7    Ruscogenin    20mg/支    魯斯考皂苷元
555-66-8    6-Shogaol    20mg/支    6-姜烯酚
3570-40-9    Albaspidin AA    20mg/支    白綿馬素AA
59092-91-0    Albaspidin AP    20mg/支    白綿馬素AP
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