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外泌體衍生物的應用

時間:2023/1/29閱讀:1078
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外泌體衍生物的應用
 近期市場研究報告預測到2030年全球外泌體研究市場規模和份額需求將達到 18.96億美元,說明外泌體具有巨大的市場潛力和行業認可度。 由于外泌體的體積較小 一般為(30–100 nm) ,所以外泌體的準確定量和表征在技術上是具有挑戰性的人。目前,已經開發并應用了許多技術來克服這些挑戰。納米粒子跟蹤分析 (NanoSight) 技術就是用于外泌體大小和定量主要方法之一。比如:Nanocoulter Ⅰ納米粒度儀采用了新一代電學原理 可以同時進行納米粒子或外泌體的單顆粒檢測,顆粒粒徑大小測量、濃度測定、 zeta電位標定、形態多維度檢測等廣泛用于外泌體的分離和純化過程中。
外泌體的物理表征方法
     常用的外泌體物理表征方法是基于顯微鏡的方法,例如透射電子顯微鏡、掃描電子顯微鏡、低溫電子顯微鏡和原子力顯微鏡 ;動態光散射 ;納米粒子跟蹤分析;可調電阻脈沖傳感;和單個 EV 分析等。
    用于分析外泌體濃度、定量和概況的分子生物方法主要包括:實時定量PCR、數字 PCR技術(基于芯片的 dPCR、液滴數字 PCR、ddPCR)、蛋白質免疫印跡、全基因組測序( next-generation sequencing)、exome-targeted sequencing(下一代測序)、微陣列圖譜技術和ELISA技術等。

外泌體衍生 miRNA 的重要應用
 miRNA 的靈敏生物標志物測定法主要用于檢測早期階段 (0-1) 腫瘤的存在。除了基于組織活檢的當前研究外,循環 miRNA 的研究是生物標志物研究中一個新的擴展領域,因為它們具有所有特征(miRNA 分析、診斷、預后、治療反應和預測性生物標志物),可在液體活檢(生物體液)中檢測到, 并且不需要對病人進行健康和腫瘤活檢。血液樣本等體液分析檢測使醫生和研究人員能夠及早了解癌癥的發展狀況。
miRNA 被稱為基因表達的基本調節因子,尤其是在癌癥中,并且在腫瘤發生、轉移和對各種療法的耐藥性中發揮重要作用。據報道,哺乳動物細胞每個細胞含有大約 100,000 個內源性 miRNA 分子。據估計,單個外泌體最多可攜帶約 500 個 miRNA 拷貝。正常人血液中的外泌體量在癌癥患者中約為 10 9個外泌體 /ml 。
 miRNA 是一類主要的小分子、單鏈、非編碼 RNA 分子,其成熟形式的長度在 20 到 22 個核苷酸 (NT) 之間,在幾乎所有生物途徑中發揮重要作用,包括細胞生長、增殖、分化、免疫反應,細胞凋亡,代謝和腫瘤發生。
外泌體在體液中的主要作用是可以保護 miRNA ,防止其生物分子在非生理條件下(多次凍融循環、長期儲存和 pH)降解。據報道,外泌體來源的 miRNA 在 -20 ° C下可保持穩定長達5年,并且對凍融循環具有抵抗力. 這也使外泌體成為癌癥和其他疾病的潛在生物標志物。miRNA 與包括癌癥在內的許多疾病的發病機制有關,并且還被證明被遠端或附近的受體細胞吸收作為外泌體中的貨物,作為細胞間通訊的一種方法,可能會影響發病機制 。所以,外泌體可以被看作是 miRNA 轉移至目標受體細胞的載體。外泌體保護 miRNA 免于降解,使它們比游離 miRNA 更穩定,并能被特定受體細胞有效整合。因此,在外泌體攜帶的貨物中,miRNA 可以提供有關它們來源的細胞類型、靶標和細胞狀態的身份信息。
越來越多的證據表明,腫瘤細胞來源的外泌體已成為通過傳遞癌 miRNA 促進腫瘤細胞增殖、侵襲、血管生成、遠處轉移和腫瘤微環境重塑的主要候選者。血管生成對于惡性腫瘤的生長和轉移至關重要,因為新血管可以提供額外的氧氣和營養物質,還可以清除廢物 。 比如:癌細胞釋放外泌體exo-miR-21、exo-miR-23;外-miR-29;exo -miR-103 和 exo-miR-210可以促進增殖、血管生成和腫瘤轉移。
如今,雖然已在各種細胞類型釋放的外泌體中找到 2838 種 miRNA。但是還是需要進一步的研究來更好地了解外泌體 miRNA 作為生物標志物在癌癥中的作用。
     增強的外泌體純化有利于下游分析,包括更準確的囊泡定量和表征。蘇州阿爾法生物提供了熒光顯微鏡、納米粒度儀 、酶標儀等實驗室儀器廣泛用外泌體分離、外泌體純化、外泌體物理等外泌體研究。我們為您提供一站式采購服務方案,同時也相信我們的服務會讓您的項目事半功倍。


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