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【應用文章下載】抗血栓藥物引起的血小板鈣流變化檢測過程詳解-Molecular Devices
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抗血栓藥物引起的血小板鈣流變化檢測過程詳解 | |||
| 血小板是從骨髓成熟的巨核細胞胞漿解脫落下來的小塊胞質，雖然僅占骨髓有核細胞總數的0.05% ，但是它在血管損傷后的止血過程中起著重要作用。除了自然止血外，它還影響著血管中血栓的形成，進而形成血栓性疾病，如心梗和缺血性中風等。 | |||
| 正常生理條件下，未受傷的血管系統(tǒng)中血小板不發(fā)生粘附、活化和聚集。血小板活化在血栓形成中起重要作用，活化可分為初級活化和進一步活化。進一步活化中有很多活性物質如膠原、二磷酸腺苷(ADP)等都可以與血小板膜上相關受體結合，進行進一步激活，如大家熟知的GPCRs受體。血小板胞質溶膠內游離鈣離子濃度的變化在血小板進一步激活中扮演至關重要的角色，當其鈣離子升高會促進血小板活化，反之亦然。 | |||
| 鈣離子作為細胞內重要的第二信使，參與了多數生物活動過程。血小板活化過程中伴隨著細胞內鈣離子的跨膜內流和血小板鈣庫的鈣離子釋放，鈣離子濃度升高后，血小板鈣庫的質膜上的鈣離子ATP酶將鈣離子重新轉運回到鈣庫之中。鈣離子流的變化是基于毫秒級別，不通過特殊、有效的檢測手段很難在較短時間內獲得大量、準確的實驗結果。 | |||
| 目前較為主流的細胞內鈣離子檢測手段是熒光探針標記法，如 Flou-4 、Indo-1 、Fura-2等。在眾多熒光探針種類中，F(xiàn)ura-2熒光探針以其自身優(yōu)勢深受大家喜愛，可直接用于微孔板讀板機系統(tǒng)或成像系統(tǒng)對其進行觀察。傳統(tǒng) Fura-2 熒光探針需要每個步驟進行清洗，相對比較繁瑣。Molecular Devices 出品的 Fura-2 QBT 具有*利的防止信號屏蔽的作用，F(xiàn)lexStation 3 是MD推出的一款內置多通道自動移液裝置，具有的Flex模式可以在短時間（毫秒級）獲得有效信號強度， 兩者結合能讓您單位時間內獲得準確、可靠的結果。 | |||
| 圖一：FURA-2 QBT 鈣流實驗的比值法分析 | |||
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| 本次我們將介紹 Fura-2 QBT鈣流試劑盒在FlexStation 3 微孔板檢測平臺如何進行實驗操作和軟件設置，獲得相應結果后如何分析。我們提供了可重復、可量化操作的解決方案，適合于高通量血小板細胞鈣離子檢測的方式，可用于激動劑EC50和拮抗劑IC50檢測和篩選工作。 | |||