貼壁細胞的消化:
1、吸去培養液,用無菌的 PBS、Hanks 液或無血清培養液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
2、加入少量胰酶細胞消化液,略蓋過細胞即可,室溫放置 30 秒至 2 分鐘。不同的細胞消化時間有所不同。
3、顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養器皿底部發現細胞的形態發生明顯的變化,或者用槍吹打細胞發現細胞剛好可以被吹打下來此時吸除胰酶細胞消化液,加入含血清的*細胞培養液,吹打下細胞,即可直接用于后續實驗。
4、如果發現消化不足,則加入胰酶細胞消化液重新消化。
5、如果發現細胞消化時間過長,未及時吹打細胞,細胞已經有部分直接從培養器皿底部脫落,直接用胰酶細胞培養液把細胞全部吹打下來。1000-2000g 離心 1 min,沉淀細胞,盡量去除胰酶細胞消化液后,加入含血清的*培養液重新懸浮細胞,即可用于后續實驗。
組織的消化:
不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。