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ELISA檢測(cè)之激素水平

閱讀:449      發(fā)布時(shí)間:2025-4-1
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ELISA(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定)是一種基于抗原-抗體特異性結(jié)合的免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù),利用酶標(biāo)記的抗體或抗原,通過(guò)酶催化的顯色反應(yīng)檢測(cè)目標(biāo)分子(如蛋白質(zhì)、抗體、激素等)的存在和含量。

 

基本原理:

 

1、抗原-抗體特異性結(jié)合:利用抗體識(shí)別特定抗原,或抗原結(jié)合特定抗體。可以分為直接法、間接法、夾心法、競(jìng)爭(zhēng)法;

2、酶標(biāo)記和顯色反應(yīng):結(jié)合特定酶(如辣根過(guò)氧化物酶HRP或堿性磷酸酶AP),通過(guò)底物反應(yīng)產(chǎn)生可檢測(cè)的顏色變化;

3、定量分析:通過(guò)比色法測(cè)定光吸收值,與標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)比較,計(jì)算待測(cè)物的濃度。

 

檢測(cè)激素的ELISA試劑盒類(lèi)型


檢測(cè)原理

適用激素類(lèi)型

激素名字

雙抗體夾心法

大分子肽類(lèi)/蛋白質(zhì)激素

Insulin(胰島素)、GH(生長(zhǎng)激素)、TSH(促甲狀腺素)、FSH(促卵泡素)、LH(促黃體生成素)

競(jìng)爭(zhēng)法

小分子激素(類(lèi)固醇)

T(睪酮)、E2(雌二醇)、PROG(孕酮)、MT(褪黑素)、 PGF2α(前列腺素)




 

樣本處理:

 

血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或 4℃過(guò)夜,然后 1000×g離心 20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

 

血漿:用 EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于 2-8℃1000×g離心 15 分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

 

組織勻漿:用預(yù)冷的 PBS (0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果),稱(chēng)重后將組織碎。將碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的 PBS(一般按 1:9 的重量體積比,比如 1g 的組織樣品對(duì)應(yīng) 9mL 的 PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在 PBS 中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。最后將勻漿液于 5000×g離心 5~10 分鐘,取上清檢測(cè)。

 

細(xì)胞裂解液:貼壁細(xì)胞用預(yù)冷 PBS 輕輕清洗,然后用胰蛋白酶消化,1000×g 離心 5 分鐘后收集細(xì)胞;懸浮細(xì)胞可直接離心收集。收集的細(xì)胞用預(yù)冷PBS 清洗 3 次,每 1×10^6 個(gè)細(xì)胞中加入 150-200uL PBS 重懸(推薦在PBS 中加入蛋白酶抑制劑;若含量很低可適當(dāng)減少 PBS 體積)并通過(guò)反復(fù)凍融或超聲使細(xì)胞破碎。將提取液于 2-8℃,1500×g 離心 10 分鐘,取上清檢測(cè)。

 

細(xì)胞培養(yǎng)上清:請(qǐng) 1000×g離心 20 分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

 

其它生物液體:1000xg離心 20分鐘,取上清即可檢測(cè)。

 

ELISA試劑盒特點(diǎn):

1、可測(cè)樣本類(lèi)型多:血清、血漿、組織、細(xì)胞培養(yǎng)上清等樣本;

2、高準(zhǔn)確度:回收率普遍在90%-115%之間;

3、高靈敏度:靈敏度達(dá)pg級(jí)別,R2大于99。

 

產(chǎn)品推薦清單


貨號(hào)

名稱(chēng)

樣本類(lèi)型

規(guī)格

abs551029

Human FSH ELISA Kit

細(xì)胞上清液,血清,血漿

96T

abs551134

Human GC ELISA Kit

細(xì)胞上清液,血清,血漿,組織勻漿,尿液,唾液,其他生物樣品

96T

abs551009

Human Growth Hormone ELISA Kit

細(xì)胞上清液,血清,血漿

96T

abs551113

Human Leptin ELISA Kit

細(xì)胞上清液,血清,血漿

96T

abs551028

Human LH ELISA Kit

細(xì)胞上清液,血清,血漿

96T

abs551031

Human TPO ELISA Kit

細(xì)胞上清液,血清,血漿

96T

abs552209

Mouse Leptin ELISA Kit

細(xì)胞上清液,血清,血漿

96T

abs553008

Rat LH ELISA Kit

血清,血漿,組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清,尿液,唾液,其他生物液體

96T

abs554114

Monkey INS ELISA Kit

細(xì)胞上清液,血清,血漿,組織勻漿,細(xì)胞裂解液,其他生物樣品

96T

abs554111

PROG ELISA Kit

細(xì)胞上清液,血清,血漿,組織勻漿,其他生物樣品

96T

abs554113

E2 ELISA Kit

細(xì)胞上清液,血清,血漿,組織勻漿,其他生物樣品

96T

abs554112

T ELISA Kit

細(xì)胞上清液,血清,血漿,組織勻漿,其他生物樣品

96T

abs554160

PGF2α ELISA Kit

血清、血漿 和 其他生物液體

96T




 

Absin產(chǎn)品線(xiàn):

爆款產(chǎn)品:試劑盒(mIHC、IHC、凋亡、ELISA、ChIP、Co-IP、TR-FRET、生化檢測(cè)、殘留檢測(cè)、多因子檢測(cè));細(xì)胞培養(yǎng)(類(lèi)器官試劑盒+基質(zhì)膠,胎牛血清+培養(yǎng)添加劑+細(xì)胞因子)、分化試劑盒;分子(mRNA合成服務(wù)+提取試劑盒);化合物大包裝;輔助試劑、耗材/儀器、定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標(biāo)記/檢測(cè))...

特色產(chǎn)品:雞胚提取物CEE、B27、N2、霍亂毒素B亞單位CTB、牛腦垂體提取物BPE、百日咳毒素PTX、重組人胰島素Insulin、人源低密度脂蛋白LDL...

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