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說一說解離液在細胞分離中的作用

閱讀:3860      發布時間:2022-7-22
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  組織解離液是由多種生物酶組成的混合物,可溫和、快速、高效地將組織中的結締組織酶解并釋放出細胞,形成細胞懸液。組織解離液適用于脾臟、肝臟、腎臟、胰腺、胃黏膜組織、膽囊、腫瘤組織等多種組織的細胞分離。解離組織獲得的細胞具有高活性,可保留細胞的表面抗原等特點,細胞可用于細胞培養、細胞分選、藥物篩選、單細胞測序等。
  解離液常用于根尖等細胞的涂片,它能使細胞壁中層(果膠質)溶解,而使細胞分開。
  解離就是用要藥液使組織的細胞相互分離開來,便于最后制片時能被壓成一薄層進行顯微觀察。解離液中酒精的作用是迅速殺死細胞,固定細胞的分裂相(將洋蔥根尖剪下后,如果不立即投入固定液中將其殺死并令其各種細胞結構凝固,那么,整個根尖將一個分裂期細胞也找不到!);而鹽酸能溶解果膠,從而使洋蔥細胞的細胞壁軟化,并使細胞間的中膠層物質溶解,從而達到分離細胞的目的。另外解離時間不宜過短,否則根尖未充分解離,壓片時細胞分不開;但又不能太長,否則使根尖過分酥軟,無法進行漂洗和染色,且染色體成分被破壞。這一步是實驗成功與否的關鍵。
  漂洗的目的是去除根中多余的解離液,特別是鹽酸,防止解離過度,破壞染色體結構。(注:不是因為染色時用的是堿性染料龍膽紫,酸與堿發生反應會影響染色效果,龍膽紫溶液呈酸性,而堿性染料是根據染料物質中助色基團電離后所帶的電荷來決定。一般來說,助色基團帶正電荷的染色劑為堿性染色劑,反之則為酸性染色劑。)

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