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新研究揭示不同細胞對胎牛血清的要求不同

閱讀:568      發布時間:2023-12-13
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與傳統的動物模型相比,體外的細胞培養模型相對操作簡便,實驗結果重復性也相對更高。.自20世紀50年代以來,胎牛血清作為常用、高效的添加物,在世界范圍內被廣泛應用于體外細胞培養。

 

胎牛血清,是由胎牛血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,其組成成份大部分已知,但還有一部分尚不清楚,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。其中不含細胞、纖維蛋白和凝血因子。胎牛血清在細胞培養方面通常優于其他類型的血清。由于胎牛從未接觸過外界,與新生牛和小牛血清相比,抗體含量明顯降低,故抗體與培養細胞發生交叉反應的風險也較低,是理想的細胞生長補充劑。

 

近日的一項研究,探究了細胞培養與胎牛血清的關系。

 

該項研究中,無論采用國產還是進口的胎牛血清培養Sp2/0其細胞克隆數、細胞數量和細胞活率差異均無統計學意義(P0.05).這與已有的研究結果相類似.究其原因可能是Sp2/0MDCK同屬細胞系,部分遺傳物質已發生改變,且帶有癌變的特點,能在體外培養條件下無限制地傳代,對血清的依賴降低,因此能在各類型血清中較好地生長增殖.研究中還發現:進口胎牛血清培養的豬胎兒成纖維細胞,其細胞克隆數、細胞數量和活率均極顯著高于國產胎牛血清(P<0.01)有科研人員利用不同來源胎牛血清培養骨髓間充質干細胞,發現在使用FBS1培養過程中,骨髓間充質干細胞逐漸死亡,而FBS2培養的骨髓間充質干細胞不但能很快貼壁和迅速增殖,而且傳代培養后能保持很強的分裂增殖能力.推測可能是因為豬胎兒成纖維細胞與骨髓間充質干細胞屬于原代細胞,保持了體內的生物學特性.因不同來源胎牛血清,其采集方式與生產加工工藝不同,所含促細胞生長因子等活性物質的組份與比例也有所不同,導致原代細胞的生長、增殖受血清來源影響較大。

 

不同來源胎牛血清質量差異大,即使同一品牌、同一貨號,因供血動物性別、生理、營養等條件不同,也會存在批次間的差異。該研究利用豬胎兒成纖維細胞對同一品牌、同一貨號,3個不同批次的胎牛血清進行了測試,結果顯示:FBS2-1形成的細胞克隆小,且細胞克隆數極顯著低于FBS2-2FBS2-3P<0.01);培養10d后,FBS2-1的細胞數量和細胞活率極顯著低于FBS2-2FBS2-3P<0.01),雖然FBS2-2的細胞克隆數極顯著低于FBS2-3P<0.01),但是FBS2-2的細胞克隆大,且細胞數量極顯著高

FBS2-3P<0.01).該項實驗篩選出FBS2-2是豬胎兒成纖維細胞的適宜血清。

 

由此實驗可以看出,不同細胞對于胎牛血清的要求不同,不同批次、品牌的胎牛血清培養效果也不盡相同,在選購時,需要盡量選擇可提供試用服務的品牌,在小范圍內,對細胞進行培養實驗,已選擇更符合實驗要求的胎牛血清。


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