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實(shí)驗(yàn)環(huán)境需要定期去清潔，MB公司的支原體祛除噴霧與DNA污染祛除噴霧/濕巾，高效預(yù)防實(shí)驗(yàn)室污染。

當(dāng)營(yíng)養(yǎng)充足時(shí)，細(xì)胞通過(guò)抑制溶酶體的合成來(lái)減少分解代謝。溶酶體是分解和回收細(xì)胞成分的細(xì)胞器。溶酶體的形成受控于轉(zhuǎn)錄因子TFEB。當(dāng)細(xì)胞得到充分的營(yíng)養(yǎng)不需要更多的溶酶體時(shí)，TFEB通過(guò)被mTORC1磷酸化從而達(dá)到被抑制的狀態(tài)。

轉(zhuǎn)錄因子TFEB是溶酶體生物發(fā)生和自噬的主要調(diào)節(jié)因子。雷帕霉素復(fù)合物1 (mTORC1)2-5的機(jī)制靶點(diǎn)對(duì)TFEB的磷酸化是mTORC1底物募集機(jī)制，該機(jī)制嚴(yán)格依賴(lài)于氨基酸介導(dǎo)的RagC GTPase激活蛋白flcn6,7的激活。TFEB缺乏負(fù)責(zé)招募其他mTORC1底物的TOR信號(hào)基序。

近日，研究人員使用低溫電子顯微鏡來(lái)確定mTORC1磷酸化后的TFEB結(jié)構(gòu)，被稱(chēng)之為“巨型復(fù)合物"。《Nature》上發(fā)表了文章：“Structure of the lysosomal mTORC1–TFEB–Rag–Ragulator megacomplex"，揭示了非典型的TFEB被mTORC1磷酸化機(jī)制。

兩個(gè)完整的rag - regulator復(fù)合物將每個(gè)TFEB分子呈現(xiàn)到mTOR活性位點(diǎn)。在沒(méi)有TFEB的情況下，一個(gè)rag - regulator復(fù)合物以典型模式與Raptor結(jié)合。

第二個(gè)拉復(fù)合體(非規(guī)范)通過(guò)與第二個(gè)調(diào)節(jié)器復(fù)合體的依賴(lài)于RagC gdp的接觸與第一個(gè)調(diào)節(jié)器復(fù)合體對(duì)接。非典型Rag二聚體在Rag G結(jié)構(gòu)域之間的間隙中通過(guò)ragc-gdp依賴(lài)的天冬氨酸鉗結(jié)合TFEB的第一螺旋。

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在細(xì)胞中，鉗位突變驅(qū)動(dòng)TFEB組成性地進(jìn)入細(xì)胞核，而對(duì)mTORC1定位沒(méi)有影響。剩余的108個(gè)氨基酸TFEB對(duì)接域環(huán)繞Raptor，然后回到RagA。RagC GDP觸點(diǎn)在兩種Rag二聚體中的雙重使用解釋了TFEB磷酸化對(duì)FLCN和RagC GDP狀態(tài)的強(qiáng)烈依賴(lài)。

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