支原體是細(xì)胞培養(yǎng)中常見的，干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果的一種污染，但由于不容易被察覺，有些污染的細(xì)胞仍在繼續(xù)使用。對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室，支原體對(duì)細(xì)胞的污染風(fēng)險(xiǎn)不容忽視，這不僅因?yàn)槌Ｒ?guī)的抗生素對(duì)支原體無(wú)效，而且因?yàn)槲廴驹缙谝矝]有顯著表現(xiàn)。一旦發(fā)生污染，支原體會(huì)影響細(xì)胞基因表達(dá)和營(yíng)養(yǎng)代謝改變，嚴(yán)重干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果（包括細(xì)胞轉(zhuǎn)染和病毒包被）。
一般來(lái)說，出現(xiàn)污染的細(xì)胞應(yīng)進(jìn)行丟棄，因?yàn)樗鼈兛赡艹蔀閷?shí)驗(yàn)室內(nèi)支原體污染的源頭，造成污染的擴(kuò)散。但對(duì)于費(fèi)力擴(kuò)增的細(xì)胞（如已轉(zhuǎn)染，或經(jīng)過體外刺激），有些人不愿意丟棄，因此，在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，定期監(jiān)測(cè)是否存在支原體污染，及時(shí)預(yù)防支原體污染是每個(gè)科研人員的工作之一。下面筆者給您推薦幾個(gè)支原體防控的產(chǎn)品，僅供參考。這些都是德國(guó)Minerva Biolabs公司出品，在國(guó)際期刊上也具有很高的引用率。
一、環(huán)境中的支原體污染的預(yù)防和清除
Mycoplasma Off是一款支原體噴霧劑，用于清除工作區(qū)域中的支原體。它起效快（10秒鐘即起效），安全無(wú)毒，對(duì)細(xì)胞不會(huì)產(chǎn)生不良影響，噴灑后，可再用干凈紙張擦拭即可。對(duì)于工作臺(tái)以及各種細(xì)胞操作的器具表面，均可使用。如果是需要避免沾染液體的電子設(shè)備，可使用Mycoplasma Off濕巾擦拭。
二、細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的祛除
通常來(lái)說，被污染的細(xì)胞應(yīng)該丟棄，以避免成為污染源。但對(duì)于珍貴的細(xì)胞，可使用Minerva Biolabs公司的Mynox®或Mynox Gold®。以往別的品牌的支原體清除劑，其實(shí)只是抑制劑，它們抑制支原體的DNA合成和蛋白合成，但無(wú)法殺除。Mynox®是市面上一款具有殺滅作用的清除劑。它提取自枯草桿菌，可與支原體膜特異性結(jié)合，破壞膜通透性，導(dǎo)致支原體膨脹破裂而死。使用Mynox®一般在2-3個(gè)小時(shí)即可完成清除任務(wù)。
Mynox Gold®是Mynox®的升級(jí)版，它通過四個(gè)療程產(chǎn)生作用。每個(gè)療程即細(xì)胞傳一代。它除了包括Mynox®，也包含復(fù)合抗生素成分。以往別的品牌的支原體清除劑只是針對(duì)支原體的抗生素成分，但也容易產(chǎn)生耐藥。Mynox Gold®將Mynox®和抗生素結(jié)合，即結(jié)合了二者的優(yōu)點(diǎn)，又去除了二者的不足，因?yàn)橛械募?xì)胞對(duì)Mynox®的治療不太適應(yīng)，而Mynox Gold®要比Mynox®更加溫和，對(duì)細(xì)胞的毒性效應(yīng)極小，因而更適用于脆弱的不太好養(yǎng)的細(xì)胞。
三、細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的監(jiān)測(cè)
可使用MB公司出品的Venor® Gem系列，常用的是一步法試劑盒（Venor® Gem OneStep），它采用靈敏的PCR方法，能識(shí)別常見的至少二十七種支原體。所有試劑均在一管內(nèi)，為穩(wěn)定的凍干粉形式，用緩沖液溶解后可直接使用。細(xì)胞上清取2l即可完成支原體的篩查。
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