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細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體檢測(cè)，分為工業(yè)檢測(cè)和實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。

工業(yè)包括生物藥生產(chǎn)、CAR-T、干細(xì)胞治療、疫苗生產(chǎn)等，需要對(duì)主細(xì)胞庫(kù)、病毒收獲液、體外擴(kuò)增的細(xì)胞等進(jìn)行支原體檢查。該檢查的方法依據(jù)是藥典。

普通科研實(shí)驗(yàn)室中的支原體檢測(cè)則需要保證細(xì)胞中沒(méi)有支原體污染，沒(méi)有詳細(xì)的方法規(guī)定。

那么，工業(yè)和科研檢支原體還有哪些區(qū)別呢？

檢測(cè)方法方面

工業(yè)可使用培養(yǎng)法、指示細(xì)胞培養(yǎng)法和NAT法（核酸擴(kuò)增技術(shù)Nucleic acid testing）。NAT法最常見(jiàn)的就是PCR和熒光定量PCR。只限定了這三種。NAT在方法驗(yàn)證后，可以替代前面兩種方法。適合CAR-T等的放行檢測(cè)。

科研則可采用各種方法，但一般不采用培養(yǎng)法，因?yàn)樵摲椒ê臅r(shí)長(zhǎng)，效率低。科研檢支原體常見(jiàn)方法有PCR法、qPCR法、酶熒光法、恒溫?cái)U(kuò)增法、DNA染色法、細(xì)胞感應(yīng)法等。

用途方面

工業(yè)檢支原體用于過(guò)程控制、放行檢測(cè)。生產(chǎn)前和生產(chǎn)后的成品都需要檢。

科研檢支原體是避免支原體污染細(xì)胞，干擾實(shí)驗(yàn)，一般是一周就要監(jiān)測(cè)一次。

污染程度

工業(yè)上支原體污染風(fēng)險(xiǎn)主要是存在于細(xì)胞和成品中，需檢測(cè)的樣本，不一定是含血清的培養(yǎng)體系。在該過(guò)程中，如果發(fā)生支原體污染，通常情況下，支原體含量會(huì)比較低，因而需要方法的靈敏度高，達(dá)到10CFU/ml。

科研上支原體污染的風(fēng)險(xiǎn)，主要是存在于細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中。科研過(guò)程中，如果發(fā)生支原體污染，往往因檢測(cè)不及時(shí)而更容易被忽視。再加上培養(yǎng)液中含有血清，支原體繁殖較快，一旦出現(xiàn)癥狀時(shí)，支原體的污染程度已經(jīng)處于較高的水平，因而對(duì)方法的靈敏度相對(duì)會(huì)低一些，而更看重方便程度。

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