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歐洲藥典中,關于「支原體檢測」的那些事

閱讀:982      發布時間:2022-9-9
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歐洲藥典

&

支原體檢測

檢測限

特異性

耐用性

歐洲藥典近二十年來,已先后出了好幾版,早在2007年版就曾提到支原體的NAT法(即核酸擴增技術,如PCR,熒光定量PCR等)。

歐洲藥典強調了對核酸檢測方法的驗證,包括檢測限、特異性和耐用性。

檢測限

在檢測限方面,歐洲藥典指出,核酸擴增法如替代藥典規定的培養法,其檢測限需達到10CFU/ml,如替代指示細胞培養法(即DNA染色法),檢測限需達到100CFU/ml。也可通過核酸拷貝數確定檢測限,但應提前建立CFU與核酸拷貝數之間的換算關系。

特異性

在特異性方面,歐洲藥典規定了NAT法應能檢測污染細胞的常見的9種支原體,包括:

萊氏無膽甾原體(A. laidlawii)

發酵支原體(M.fermentans)

豬鼻支原體(M. hyorhinis)

口腔支原體(M. oral)

精氨酸支原體(M. arginini)

肺炎支原體(M. pneumonia)

雞毒支原體(M. gallisepticum)

滑液支原體(M. synoviae)

螺原體(Spiroplasma citri)

并且,NAT法應檢查與細菌、哺乳動物DNA是否有交叉反應。

耐用性

那么,進行方法驗證還需要什么呢?

答案就是:標準品!

標準品好比一把尺子,能確定你所用的支原體PCR或qPCR檢測試劑盒到底是否符合要求。

舉個例子:可使用10CFU/管和100CFU/管的支原體標準品,支原體靈敏度套裝囊括了以上提到的9種常見支原體,而且這些支原體都是凍干粉型滅活的,不會給實驗室帶來支原體污染,這一點也令人很放心。


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