9核酸擴增技術與支原體檢測
自1988年以PCR為代表的核酸擴增技術問世以來，該技術已廣泛應用于科研和臨床，但由于標準化的建立需要一定的時間，因此用于生物制藥則相對較晚。
國外已有不少藥廠將PCR或qPCR用于工業(yè)放行檢測中的支原體檢查。PCR或qPCR的靈敏度、特異性、適用性和可靠性具有達到藥典標準的潛在可能。但需要按步驟和程序開展方法驗證。
支原體檢測方法驗證
有研究人員指出，有些PCR檢測法，在反應條件及引物設計上，仍需不斷改良以提高其檢測效率。曾有研究人員，用半巢式PCR檢測70份支原體污染的樣本（主要為生物制品生產(chǎn)用細胞基質(zhì)），結果只檢出60份，說明PCR要應用于工業(yè)檢測支原體，其首要因素是要提高檢測限。
傳統(tǒng)支原體檢查方法是培養(yǎng)法和指示細胞培養(yǎng)法，并為藥典所認可和收錄。近年來，支原體qPCR檢測在工業(yè)領域的應用越來越多，但在項目申報前，先需要進行方法學驗證，依據(jù)藥典，在檢測限、特異性和耐用性方面達到要求后，才能替代傳統(tǒng)的檢查方法。
好物推薦
支原體qPCR檢測試劑盒因其操作時間短（僅需2-3小時）、靈敏度和特異性高而廣受科研人員青睞。
目前國外藥廠放行檢測（product release testing）采用的較多的是德國Minerva Biolabs(簡稱MB)公司的Venor® Gem qEP (qPCR法)和Venor® Gem Classic(常規(guī)PCR法)。Venor® Gem qEP由于無須跑膠，且能定量，因而使用更為便捷。
MB Venor® Gem qEP 試劑盒的特點：
1）使用靈活
* 與幾乎所有商用循環(huán)儀兼容
* 可選擇常規(guī)PCR或實時熒光定量PCR
2）高性能
* 高耐用性、高靈敏度和高特異性（>100種支原體物種可檢測）
* 符合EP 2.6.7 / USP <71> / JP G3標準。提供內(nèi)部擴增對照，
用于過程監(jiān)測。有產(chǎn)品驗證報告
3）使用方便
* 預先分裝PCR mix（25個反應），保證長期穩(wěn)定性
* 組分為凍干粉形式，使運輸與存儲更簡單
* 探針檢測，結果清晰（qPCR）
可考慮的標準品需要經(jīng)過嚴格標定。需考慮有國際聲譽和質(zhì)控報告的標準品廠家。下面介紹某廠家標準品類別如下：
配套用于過程驗證和檢測的標準品（EP2.6.7/USP<71>/JP G3）：
* 10CFU™靈敏度標準品，包括所有EP和JP列舉的支原體物種
* 100CFU™靈敏度標準品
* 支原體和細菌基因組DNA（特異性驗證用）
* PCR定量標準品（108拷貝DNA/管）
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