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北京締一生物科技有限公司

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細胞培養中的污染監控與檢測——真菌

閱讀:770      發布時間:2022-3-4
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上一篇文章中,我們說到如果在養細胞的過程中,如何判斷細胞是否被細菌感染以及如何祛除細菌污染。

還沒看的戳戳下面的鏈接直達

細胞培養中的污染監控與檢測——細菌

今天我們來討論一下,細胞培養過程中的真菌感染


二、真菌污染

真菌概述

真菌是一類具真核和細胞壁的異養生物。真菌可以通過孢子延續種群,典型的營養體為絲狀分支結構。可污染細胞培養基的真菌種類繁多,最常見的有曲霉菌,白色念珠菌,酵母菌,黑霉菌,孢子菌等。


真菌污染癥狀

與其他污染相比,真菌污染更容易被觀察到。具體表現為:

  • 在培養基中會形成淡黃色或白色的漂浮物,肉眼可見,較易被發現

  • 短期內培養液多不變混濁

  • 顯微鏡下可以看見細胞之間或是培養基中,有縱橫交錯穿行的絲狀樹枝狀或管狀菌絲

  • 多數菌絲在高倍鏡下可以觀察到鏈狀排列的菌株,而念珠菌及酵母菌菌株呈卵圓形,散落在細胞上及細胞周邊生長。


真菌污染的鑒定

將待檢測的細胞培養基,接種在真菌專用培養基上進行鑒定,例如:馬丁培養基、沙氏培養基等。


真菌污染的處理方法

首先應盡快把污染細胞與其它細胞系隔離開,不要打開培養皿,以免孢子飛出;


同時需要對實驗過程中所用的器材、試劑和操作空間做相應處理:消毒液噴灑、紫外線消毒、高溫滅菌等;


高濃度的抗生素或是抗菌素(兩性霉素 B 、泰樂菌素等)對細胞會產生一定毒性,在使用前可以進行劑量反應實驗確定影響;


跟細菌污染的處理方法類似,通常情況下,霉菌污染的細胞,如果不是特別珍貴,建議直接丟棄

如何預防支原體的污染

通常來說,被污染的細胞應該丟棄,以避免成為污染源。但對于珍貴的細胞,以往別的品牌的支原體清除劑,其實只是抑制劑,它們抑制支原體的DNA合成和蛋白合成,但無法殺除。是市面上一款具有殺滅作用的清除劑。它提取自枯草桿菌,可與支原體膜特異性結合,破壞膜通透性,導致支原體膨脹破裂而死。


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