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北京締一生物科技有限公司

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牛血清外源因子檢查內容

閱讀:898      發布時間:2020-8-6
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牛血清富含細胞生長必要的因子,但牛血清在生產制作中也存在引入外源因子的風險。所以在遵循牛血清生產的GMP規范也要對其做全面的質控檢測。

外源因子主要包括微生物、內毒素和病毒抗體等。

01、微生物

1. 細菌和真菌

其中細菌又分為需氧菌和厭氧菌。

這兩種微生物的檢查又稱為無菌檢查。現多采用培養法。我國藥典通則1101和美國藥典USP<71>有關于無菌檢查方法的說明。

牛血清在生產過程中,經0.22mm孔徑的濾膜過濾,可*祛除細菌和真菌,因其大小>1mm。

2. 支原體

支原體大小介于0.1mm~0.3mm

牛血清在生產過程中,經0.1mm孔徑的濾膜三次過濾,可*祛除支原體。

支原體檢查也采用培養法,可參看我國藥典通則3301和美國藥典USP<63>

3. 病毒

病毒檢查包括細胞培養法及熒光抗體檢測。細胞培養法包括細胞病變效應和血吸附檢查。檢測多為導致牛常見傳染病的病毒,如牛副流感病毒型(PI3)、牛腺病毒(BAV-3 ) 、牛細小病毒(BPV ) 以及牛病毒性腹瀉病毒(BVD)等。其中,BVD以其發病率高,亞型不具有細胞病變效應而尤其受到重視。

 

02、內毒素

內毒素是革蘭氏陰性菌的細胞壁成分,主要為脂多糖。內毒素對細胞產生刺激,直接導致細胞凋亡,因此內毒素被用來進行血清評級。特級胎牛血清內毒素要求≤10EU/ml。但內毒素濃度越低越好,尤其是對于一些嬌氣的細胞。

內毒素的檢測是采用鱟試劑法。

 

03、病毒抗體

動物感染病毒后,會刺激機體產生抗體。感染治愈后,抗體會長期存在。病毒抗體會影響疫苗細胞苗的毒價。如豬瘟細胞苗的生產,就不能用含BVD抗體的牛血清,因該抗體與豬瘟病毒抗原之間會發生特異性交叉反應。2020版中國藥典也規定用于乙腦疫苗生產的新生牛血清,應為乙腦抗體陰性。

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