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在食品和飼料的初級生產階段，以及食品車間環境中，常需檢查腸桿菌科細菌的存在和計數。在《ISO 21528-1：2017 食品和動物飼料的微生物學 腸桿菌科檢測和計數的水平法》中，可以看到該標準關于腸桿菌科的檢測方法的推薦。

ISO 21528-1：2017取代的是ISO 21528-1:2004，主要是做的方法上的調整，如原先是用緩沖蛋白胨水（BPW）預增菌，再用EE肉湯增菌，現在則改用

BPW直接增菌；驗證試驗是用葡萄糖OF培養基，而非葡萄糖瓊脂。該ISO適合兩種情況，一是微生物需要通過增菌來復蘇，二是預期微生物數量小于100/ml（g）樣品。

其大致流程如下：首先將樣品在BPW孵育37℃，18h，再在VRBG培養基上接種，37℃孵育24h±2h，觀察典型菌落（粉紅色菌落）。再選擇可疑菌落，接種至非選擇性培養基如營養瓊脂平板上進行純培養，37℃孵育24h±2h。然后挑取一個菌落進行氧化酶試驗。如為陰性。則對該菌落再進行葡萄糖發酵試驗。葡萄糖發酵試驗采用的是葡萄糖OF培養基，37℃孵育24h±2h后，如果試管液體變為黃色，則為陽性反應。

這是即可匯報檢測結果了。如果不想做上述2種驗證試驗，而且需要進一步對腸桿菌科鑒定到種，則可采用HiMedia公司生產的生化鑒定卡。HiMedia公司至少有2種腸桿菌科生化鑒定卡，一種貨號是KB003品名為Hi25™ Enterobacteriaceae Identification Kit。另一種貨號是KB016，品名為Hi24™ Enterobacteriaceae Identification Kit。 KB003包含25項檢查（含13種傳統生化試驗和含葡萄糖在內的11種糖發酵試驗和1個氧化酶試劑紙片），可鑒定68種腸桿菌。KB016包含24種生化類型，可鑒定65種腸桿菌。KB016和KB003相比，有15種生化反應二者重合：

ONPG試驗、賴氨酸脫羧試驗、鳥氨酸脫羧試驗、尿素酶試驗、苯丙氨酸脫氨試驗、伏普試驗、甲基紅試驗、吲哚試驗、七葉苷水解試驗、纖維二糖發酵試驗、蜜二糖發酵試驗、蔗糖發酵試驗、海藻糖發酵試驗、葡萄糖發酵試驗、乳糖發酵試驗、

KB003*的生化反應包括：

硝酸鹽還原試驗、H2S產生試驗、檸檬酸利用試驗、丙二酸利用試驗、阿拉伯糖發酵試驗、木糖發酵試驗、核糖醇發酵試驗、鼠李糖發酵試驗、棉子糖發酵試驗、氧化酶紙片試驗。

KB016*的生化類型包括：

吡咯烷酮酶試驗、β-葡萄糖醛酸酶試驗、α-半乳糖苷酶試驗、β-木糖酶試驗、山梨醇發酵試驗、水楊苷發酵試驗、甘露糖發酵試驗、麥芽糖發酵試驗、

在實際腸桿菌科成員的鑒定中，客戶可選擇使用。

HiMedia公司是微生物產品生產商，一直致力于微生物培養和鑒別鑒定產品的研發和生產，具有WHO GMP認證、ISO9001：2008，ISO13485：2003認證，CE認證和FDA注冊登記。其產品行銷140多個國家。

締一生物作為HiMedia公司在中國的代理商，在微生物培養和檢測領域，一如既往地為您帶來的服務。