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上海研生實(shí)業(yè)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第10年

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臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞;EA.hy926

參  考  價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-03-21 19:39:42瀏覽次數(shù):199次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào) YS-02X9780 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研使用
臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞;EA.hy926公司正在銷(xiāo)售的產(chǎn)品:鈣粘蛋白14抗體Anti-Trk B 酪酶B抗體
鈣活氯離子通道蛋白3抗體Anti-Trk C 酪酶C抗體(神經(jīng)生長(zhǎng)因子受體的一種)
CD200受體抗體Anti-Trop-2 原肌球蛋白抗體
彈性蛋白酶1抗體Anti-TRP2 酪酶相關(guān)蛋白2抗體

產(chǎn)品名稱(chēng):臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞;EA.hy926

規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào):YS-02X9780

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) :細(xì)胞生長(zhǎng)良好,形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件:2℃-8℃,避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件:冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞特性:

1)】組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定:細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式:上皮樣,不規(guī)則細(xì)胞,貼壁培養(yǎng)。

91.jpg 

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。

二. 細(xì)胞處理:

1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項(xiàng):

1)凍存前細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,細(xì)胞密度適合,剛剛發(fā)生細(xì)胞融合,過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好,而且消化時(shí)不容易分散;

2)凍存的密度不宜過(guò)低,10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好,我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個(gè)細(xì)胞)分成兩管。

3)消化和吹打,切忌胰酶消化過(guò)度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。

4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很?chē)?yán)格,我從10%-90%都用過(guò),問(wèn)題不大,個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛!另外,凍存液可以在處理細(xì)胞前配置,放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸,移入凍存管。

5)關(guān)于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長(zhǎng),-80度過(guò)夜,最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室,推薦使用程序降溫盒,內(nèi)裝異丙醇,在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。

AFP/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記鼠抗人甲胎蛋白單克隆抗體(包被)IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

DVL1 (dishevelled 1) 蓬亂蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

凝聚素α/β抗體  Apo J/Clusterin-α/β/Apolipoprotein J 0.1ml

ZNF537 英文名稱(chēng): 鋅指蛋白537抗體 0.2ml

DPCR1 英文名稱(chēng): DPCR1蛋白抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-Ep300 (Ser89) 磷酸化轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300抗體 規(guī)格 0.1ml

DVL1 (dishevelled 1) 蓬亂蛋白1Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg

PINP 人I型前膠原肽Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

 phospho-c-Jun (Ser243) 磷酸化原癌基因c-Jun抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh NTCP/SLC10A1 鈉離子/磺膽酸共轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 規(guī)格 0.1ml

T4 Polynucleotide Kinase T4 DNA 激酶 1000 ul(1000次反應(yīng))

TIMP-1(NT) 英文名稱(chēng): 金屬蛋白酶組織抑制因子-1抗體(N端) 0.1ml

C8orf86 英文名稱(chēng): 8號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框86抗體 0.2ml

 phospho-c-Jun (Ser243) 磷酸化原癌基因c-Jun抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml

Rabbit  rat IgG 兔抗大鼠IgG 1mg

FLAG Tag (NT) 英文名稱(chēng): FLAG Tag標(biāo)簽抗體(N端) 0.1ml

熱休克蛋白-90β 抗體  HSP-90β 0.1ml

 PMP-22/FITC 熒光素標(biāo)記外周髓鞘蛋白-22IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Rb(Ser612) 磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1抗體 規(guī)格 0.1ml

Goat  Mouse IgM Whole serum 羊抗小鼠IgM抗血清Multi-class antibodies規(guī)格: 1ml
臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞;EA.hy926尼群地平落新婦苷通用型禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病(Reticuloendotheliosis Virus;REV)基因檢測(cè)試劑盒   

尼群地平(標(biāo)準(zhǔn)品)麻醉椒苦素通用型禽白血病J亞型(avian leukosis virus subgroup J;ALV-J)基因檢測(cè)試劑盒  

華蟾它靈;華蟾素(標(biāo)準(zhǔn)品)馬兜鈴內(nèi)酰通用型禽白血病A/B/C亞型(ALV-A/B/C)基因檢測(cè)試劑盒  

維甲酰酚馬兜鈴酸A通用型禽病性肺炎(Avian Pneumovirus;APV)基因檢測(cè)試劑盒

2-氨基嘌呤,異腺嘌呤;異腺素;2-AP馬錢(qián)苷通用型禽霍亂(Pasteurella multocida;PM)基因檢測(cè)試劑盒   

3,5-二羥基甲馬錢(qián)苷酸通用型雞傳染性支氣管(Infectious Bronchitis Virus;IBV)基因檢測(cè)試劑盒  

遠(yuǎn)華蟾蜍精(標(biāo)準(zhǔn)品)麥冬皂苷D通用型雞傳染性法氏囊病(Infectious Bursal Disease/Gumboro Disease;IBD)基因檢測(cè)試劑盒  

日蟾蜍他靈;和蟾他靈(標(biāo)準(zhǔn)品)蔓荊子黃素通用型雞病性關(guān)節(jié)炎呼腸孤病(Reovirus;REO)基因檢測(cè)試劑盒  

使用步驟:

一)準(zhǔn)確稱(chēng)量試劑:根據(jù)不同的菌類(lèi)和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

(二)校正pH值:將稱(chēng)量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi),標(biāo)記劃線,加熱溶解,補(bǔ)充水分,測(cè)定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

(三)過(guò)濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明。

(四)分裝:將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準(zhǔn)備滅菌。

(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死,但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質(zhì)易于凝固變性,因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng),殺菌效果好。

 


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