細(xì)胞特性：

1)】組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱：肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號(hào)：YS-02X10017

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長(zhǎng)良好，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過(guò)低，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過(guò)度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過(guò)，問(wèn)題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長(zhǎng)，-80度過(guò)夜，最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補(bǔ)充水分，測(cè)定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過(guò)濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明。

（四）分裝：將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng)，殺菌效果好。

RXR Alpha/FITC 熒光素標(biāo)記核受體RXRα抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

bovine Insulin protein 胰島素蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 10mg

一種細(xì)胞應(yīng)激分子抗體  MICA 0.1ml

SLC34A2 英文名稱： 磷酸鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 0.1ml

FOXO1A 英文名稱： 叉頭蛋白O1抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-PERK(Thr980) 磷酸化蛋白激酶樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶抗體 規(guī)格 0.1ml

bovine Insulin protein 胰島素蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 10mg

NKB(Human Neurokinins B) ELISA Kit 人神經(jīng)激肽BMulti-class antibodies規(guī)格： 48T

 HAI-1 肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子激活物抑制劑抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh MLCK 肌球蛋白輕鏈激酶抗體 規(guī)格 0.1ml

NE(Human neutrophil elastase) ELISA Kit 人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶 96T

STAT4 英文名稱： 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子4抗體 0.1ml

CD97 antigen subunit alpha 英文名稱： 白細(xì)胞抗原CD97 alpha 抗體 0.1ml

 HAI-1 肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子激活物抑制劑抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Mouse  Rabbit IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗兔IgM 0.1ml

Phospho-FOXO1 + FOXO3 + FOXO4 (phospho T24 + T32) 英文名稱： 磷酸化叉頭蛋白家族抗體 0.1ml

致癌基因抗體  C-Myc/MYC/MTLC 0.1ml

 P-p38 ERK/MAPK14 /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化-原活化蛋白激酶p38抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PILR beta 細(xì)胞表面受體PILRβ抗體 規(guī)格 0.2ml

Mouse  human IgG Monoclonal Antibody/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記小鼠抗人IgG單克隆抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基/酵母細(xì)胞細(xì)胞壁分離試劑盒20次人β萘酚（β-Nph）ELISA試劑盒,

細(xì)胞可溶性總核蛋白制備試劑盒20次小鼠FMS樣酪酶3配體（Flt3L）ELISA試劑盒,

組織可溶性總核蛋白制備試劑盒20次人可溶性白抗原G（sHLA-G）ELISA試劑盒,

細(xì)胞漿可溶性總蛋白制備試劑盒20次人血小板因子3（PF-3）ELISA試劑盒,

線粒體可溶性總蛋白制備試劑盒20次人甲狀腺結(jié)合球蛋白（TBG）ELISA試劑盒,

高純胞漿S100蛋白制備試劑盒20次人高靈敏度促甲狀腺素（U-TSH）ELISA試劑盒,

細(xì)胞可溶性總蛋白制備試劑盒20次人N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯（AcSDKP）ELISA試劑盒,

組織可溶性總蛋白制備試劑盒20次小鼠白血病抑制因子（LIF）ELISA試劑盒,

植物組織可溶性總蛋白粗提制備試劑盒20次小鼠β萘酚（β-Nph）ELISA試劑盒,

植物組織可溶性總蛋白*制備試劑盒20次大鼠脫氫表雄酮S7（DHEA-S7）ELISA試劑盒,

植物組織可溶性疏水總蛋白制備試劑盒20次大鼠C反應(yīng)蛋白（CRP）ELISA試劑盒,

植物組織可溶性親水總蛋白制備試劑盒20次大鼠D2（VD2）ELISA試劑盒,

植物組織可溶性總核蛋白粗提制備試劑盒20次瓊脂用于分離培養(yǎng)

植物組織可溶性總核蛋白高純制備試劑盒10次D-組

植物組織可溶性膜蛋白粗提制備試劑盒20次還原Ⅰ二鈉鹽