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污染是細胞培養的大敵常見的污染類型

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污染是細胞培養的大敵常見的污染類型

細胞培養過程中的污染不僅僅指微生物,而且還包括所有混入培養環境中的、對細胞生存有害或造成細胞不純的物質,包括生物和化學物質。

1、細菌污染

細菌污染是實驗室細胞培養中常見的污染,即使在細胞培養液中加入了抗菌素,也可能因為操作不慎而引起污染。zui常見的有革蘭氏陽性菌,如枯草桿菌以及大腸桿菌、假單胞菌等革蘭氏陰性菌,其中又以白色葡萄球菌較常見。

培養細胞受細菌污染后,會出現培養液變混濁,pH改變。污染后細胞發生病理改變,胞內顆粒增多、增粗,zui后變圓脫落死亡。

2、支原體污染

支原體是介于細菌與病毒之間能獨立生活的zui小微生物,zui小直徑0.2μm,一般過濾除菌無法去除它,光鏡下難以看清它的形態結構。開始不易發現,能在偏堿條件下生存,對青霉素有抗藥性。多吸附于細胞表面或散在于細胞之間。

培養細胞受支原體污染后,部分敏感細胞可見細胞生長增殖變慢,部分細胞變圓,從瓶壁脫落。但多數細胞污染后無明顯變化,或略有變化,若不及時處理,還會產生交叉污染。

3、病毒污染

組織細胞培養過程中,如果沒有除去潛在的病毒,就會產生病毒污染。目前,從原代猴腎細胞的培養中已發現不少于20種血清性病毒。

盡管病毒污染的細胞不影響原代培養,但疫苗是不安全的。因此,潛在病毒是細胞大量和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題。

4、真菌污染

真菌污染是細胞培養過程中zui常見的一種,zui常見的真菌有煙曲霉、黑曲菌、孔子霉、毛霉菌、白色念珠菌和酵母菌。

培養細胞受真菌污染后,可見培養液中漂浮著白色或淺黃色的小點,有的散在生長,培養液一般不發生混濁;倒置顯微鏡下可見絲狀、管狀或樹枝狀的菌絲縱橫交錯在細胞之間或培養基中,有的呈鏈狀排列。

真菌污染后,細胞生長變慢,但zui后由于營養耗盡及毒性作用而使細胞脫落死亡。

5、非同種細胞污染

由于細胞培養操作時各細胞株所需的器材和溶液沒有嚴格分開,往往會使一種細胞被另一種細胞污染。目前,世界上已有幾十種細胞都被HeLa細胞所污染,致使許多實驗宣告無效。

非細胞培養物所造成的化學成分的污染也偶有發生,大多是由于細胞培養所需物品清洗消毒不*而帶入一些有毒化學物質所致。

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