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EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KM9801圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KM9801圖片
形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性  該細(xì)胞來源于一正常男性的外周血。1998年由*昆明細(xì)胞庫通過EB病毒轉(zhuǎn)化的方法建立。
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  15%NBS
傳代方法  1:2傳代；5-6天一次
傳代情況 P4
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR  -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KM9801圖片細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KM9801圖片質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測，*進(jìn)口來源，*保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞；KM9801圖片操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

CAS389-08-2 萘啶酮酸 5g
CAS38183-12-9 熒光胺 25mg
CAS38183-12-9 熒光胺 25mg
CAS38183-12-9 熒光胺 25mg
CAS3810-74-0 硫酸鏈霉素 5g
CAS3810-74-0 硫酸鏈霉素 5g
CAS3810-74-0 硫酸鏈霉素 5g
CAS38099-82-0 D- 果糖 -1,6- 二磷酸鈉鹽 100mg
CAS38099-82-0 D- 果糖 -1,6- 二磷酸鈉鹽 100mg
CAS38099-82-0 D- 果糖 -1,6- 二磷酸鈉鹽 100mg
CAS37380-43-1 吸附樹脂 XAD7 100g
CAS37380-43-1 吸附樹脂 XAD7 100g
CAS37380-43-1 吸附樹脂 XAD7 100g
CAS37326-33-3 透明質(zhì)酸酶 100mg
CAS37326-33-3 透明質(zhì)酸酶 100mg
CAS37326-33-3 透明質(zhì)酸酶 100mg
CAS37288-57-6 β －瓊脂糖酶 25U
CAS37288-57-6 β －瓊脂糖酶 25U
CAS37288-57-6 β －瓊脂糖酶 25U
CAS37288-25-8 S1 核酸酶 10ku
CAS37288-25-8 S1 核酸酶 10ku
CAS37288-25-8 S1 核酸酶 10ku
CAS37224-29-6 葡聚糖凝膠 G-75 中顆粒 25g
CAS37224-29-6 葡聚糖凝膠 G-75 中顆粒 25g
CAS37224-29-6 葡聚糖凝膠 G-75 中顆粒 25g
CAS369-07-3 鄰硝基苯 -β-D- 吡喃半乳糖苷 1g
CAS369-07-3 鄰硝基苯 -β-D- 吡喃半乳糖苷 1g
CAS369-07-3 鄰硝基苯 -β-D- 吡喃半乳糖苷 1g
CAS367-93-1 異丙基 -β-D- 硫代半乳糖苷 1g
CAS367-93-1 異丙基 -β-D- 硫代半乳糖苷 1g
CAS367-93-1 異丙基 -β-D- 硫代半乳糖苷 1g
CAS3671-99-6 葡萄糖 -6- 磷酸二鈉 500mg
CAS3671-99-6 葡萄糖 -6- 磷酸二鈉 500mg
CAS3671-99-6 葡萄糖 -6- 磷酸二鈉 500mg
CAS36051-31-7 5′ - 三磷酸鳥苷三鈉 10mg
CAS36051-31-7 5′ - 三磷酸鳥苷三鈉 10mg
CAS36051-31-7 5′ - 三磷酸鳥苷三鈉 10mg
CAS3483-82-7 N- 苯甲酰 -L- 酪氨酸乙酯 1g
CAS3483-82-7 N- 苯甲酰 -L- 酪氨酸乙酯 1g
CAS3483-82-7 N- 苯甲酰 -L- 酪氨酸乙酯 1g
CAS3483-12-3 二硫蘇糖醇 (DTT) 5g
CAS3483-12-3 二硫蘇糖醇 (DTT) 5g
CAS3483-12-3 二硫蘇糖醇 (DTT) 5g
CAS3458-28-4 D- 甘露糖 5g
CAS3458-28-4 D- 甘露糖 5g
CAS3458-28-4 D- 甘露糖 5g