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培養液可輕微渾濁，在顯微鏡下細小的點狀物數量非常多，輕微活動，ATCC細胞雖然可以生長但繁殖速度卻明顯減慢，而且細胞狀態不好，邊緣不清楚，細胞不透亮。他們與細胞可共生但會與細胞爭奪營養。這種共生是非常普遍的，但他們的數量小，細胞占優勢所以不會影響到細胞的正常生長，只有當他們到達一定的數量時就會影響到細胞的生長，zui終形成惡性循環。
ATCC細胞污染的可能原因：配液消毒問題、操作問題、環境問題等等。
關于培養基的無菌狀況，取培養基至培養瓶中（不加細胞），37 度試培養一段時間后觀察。如果沒有細菌生長 就是操作的問題。也可以在培養基中事先加入雙抗（硫酸鏈霉素和氨芐青霉素）。但雙抗有時會影響細胞的狀態，所以在做轉染、檢測細胞某項指標前一定要撤去雙抗，以避免影響實驗結果。
ATCC細胞實驗前，超凈臺/實驗間紫外照射30min，細胞培養室有24h的空氣消毒裝置更好了。操作前70％酒精擦超凈臺消毒，酒精擦手，擦培養瓶，擦培養基瓶以及各種瓶子的口，總之，所有進超凈臺的物品都用酒精擦拭一遍。拿培養瓶和培養液時候盡量托下面拿，切忌不要拿瓶頸部位。有一點要注意的是，超凈臺里面的東西一定要盡量少放，東西太多活影響超凈臺內空氣流通及空氣除菌。實驗過程中盡量避免打鬧說笑。
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