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ATCC細胞電融合方法

時間:2018-4-18閱讀:327
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1、儀2S結構和使用方法
JCF-型ATCC細胞電融事儀的各項技術參數是通過大量的融合實驗數據,并參考島津公司(日)SSH型電融合裝置的參數值而設計的.當打開電源,指示燈亮,并撥通輸出開關和正弦輸出開關,選擇和按下正弦頻率按鍵(共分為0.6、0.8、1.3、1.5MHz五檔),此時將輸出電纜與示波器相接,在示波器上即出現高頻正弦波形,當左右旋轉正弦幅度旋鈕,則正弦電壓的p-p值,也隨之降低和升高,如果將輸出電纜與電融合室相接,則細胸相互連接.此時再旋動正弦幅度(即正弦電壓)旋扭,則儀器上電壓表指針隨之升高和降低.如果正弦電壓過高,則細胞連接速度加快,并呈串珠狀,不利于兩細胞融合。
將正弦輸出開關搬至“復合輸出”檔,根據所需功率大小選拔復合輸出I或、II檔、I檔為低功率,II檔為高功率;再根據實驗要求,選擇并按下你所需要的“脈沖寬度”撥鍵(分1ms,0.2ms、0.1ms、10ms、1us五檔)和“脈沖幅度”按鍵(50V、100V、150V、200V、250V五檔),還配有脈沖幅度旋扭(細調),調整范圍0-50V,可使每檔增值50V。
施加脈沖刺激可分為“自控”和“手控”兩檔,當使用“自控”輸出脈沖時,先將開關搬向自控檔,然后根據需要選擇并按下“脈沖頻率按健”(分為2sl次及每秒1次、2次、5次、l0次共五檔),即可自動發送電脈沖;如果將開關搬至“手控”檔,需按動“手控”按扭,每按動一次發送一個脈沖。無論自控或手控輸出,每個脈沖輸出都伴有報鳴音響,將輸出端與脈沖示波器連接,則可觀察到由脈沖寬度、幅度及脈沖間隔所構成的示波圖像,當改變以上有關參數值時,其圖像亦發生變化:把開關搬向反向,則產生負脈沖,當脈寬和幅度等值不變時,其圖像與正脈沖波形相同,但方面相反,上下對稱.將電纜輸出端與電融合室的兩電極相接,并按上述要求發送一定方波脈沖,細胞受到電刺激后,可產生融合。
2、ATCC細胞電融合操作
植物原生質體融合
開啟電源,關閉“輸出開關”,將開關搬向正弦輸出檔,此時可根據實驗需要,將正弦額度選擇在1—1.3MHz,脈沖寬度為0.1ms或)10μs,脈沖幅度為150V,脈沖頻率為1次/s,并依次按下各標定按鍵,zui后調整正弦電壓(即正弦幅度)旋扭,使電壓表處于5-10V處。 
Tetracaine Hydrochloride    200mg    鹽酸丁卡因標準品    136-47-0 
Tetracycline Hydrochloride     200mg    鹽酸四環素標準品    64-75-5 
Tetrahydrozoline Hydrochloride     200mg    鹽酸四氫唑啉標準品    522-48-5 
Thalidomide     200mg    沙利度胺標準品    50-35-1 
Thiabendazole    100mg    噻苯咪唑標準品    148-79-8 
Thiamylal CIII DISCONTINUED    200mg    硫戊比妥標準品    
Thiethylperazine Malate    200mg    蘋果酸硫乙拉嗪標準品    52239-63-1 
Thiethylperazine Maleate     200mg    馬來酸乙巰拉嗪標準品    1179-69-7 
Thimerosal     500mg    硫柳汞鈉標準品    54-64-8 
Thioguanine    200mg    硫鳥嘌呤標準品    154-42-7 
ATCC細胞

 

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