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轉(zhuǎn)化細(xì)胞亮度的判斷

時間:2018-1-29閱讀:188
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轉(zhuǎn)化細(xì)胞熒光信號強(qiáng)細(xì)胞群體的SD比熒光信號弱的細(xì)胞群體大;
② 多色分析時,一種熒光素(如FITC)的光會漏入相鄰的熒光素(如PE)的檢測器。漏入的光越多,需要補(bǔ)償?shù)脑蕉?,對分辨率的影響就越大。尤其是弱表達(dá)的信號。

 盡量減少熒光信號之間的干擾
① 檢測的顏色越多,面臨的熒光信號之間的干擾越多;
② 選擇試劑組合時盡可能降低熒光發(fā)射波長之間的重疊。

儀器配置的差異,多色分析不可能全選“zui亮”的熒光素,但對于特定的一款儀器,可以根據(jù)熒光的強(qiáng)弱列出可選的染料。
 亮度的判斷:就是熒光染料的靈敏度,區(qū)分背景和弱陽性信號的能力。

 影響背景的因素有檢測器的電子噪音、細(xì)胞自發(fā)熒光、來自其他檢測器的信號干擾,這些因素也增加了陰性熒光峰的寬度(標(biāo)準(zhǔn)差)。

轉(zhuǎn)化細(xì)胞靈敏度好的標(biāo)準(zhǔn)是染色指數(shù):D/W,D指的是陽性峰與陰性峰的平均熒光強(qiáng)度的差;W是陰性峰的2SD。
Lycorine chloride    HPLC≥98%    鹽酸石蒜堿
Glabridin    HPLC≥98%    光甘草定
aurantio-obtusin    HPLC≥98%    橙黃決明素
Nuciferine    HPLC≥98%    荷葉堿
Biochanin A    HPLC≥99%    鷹嘴豆芽素A
10-hydroxycamptothecin    HPLC≥99%    10-羥基喜樹堿
Theobromine    ≥99%    可可堿
D-Pinitol    95%    D-松醇
Hederagenin    HPLC≥98%    常春藤皂苷元
8-Methoxypsoralen    HPLC≥98%    花椒毒素
Peucedanol    HPLC≥98%    白花前胡醇
轉(zhuǎn)化細(xì)胞

 

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