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體外培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞生物學(xué)檢測

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體外培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞生物學(xué)檢測

一旦培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞生長成形態(tài)上單一的細(xì)胞群體或細(xì)胞系(或株)后,不論用于實驗研究還是建立細(xì)胞系,都需要做一系列的細(xì)胞生物學(xué)測定,主要的目的在于求得證明:

所培養(yǎng)的細(xì)胞系的確來源于原體內(nèi)具有惡性的細(xì)胞,而非正常細(xì)胞或其它細(xì)胞。均具有瘤種特異性。闡明一般生物學(xué)性狀。測定項目數(shù)量無明確規(guī)定,根據(jù)需要而定,以下為常做的項目和要點。

【形態(tài)觀察】主要觀察細(xì)胞的一般形態(tài),如大體形態(tài)、核漿比例、染色質(zhì)和核仁大小、多少等以及細(xì)胞骨架微絲微管的排列狀態(tài)等。

【細(xì)胞生長增殖】檢測細(xì)胞生長曲線、腫瘤細(xì)胞分裂指數(shù)、倍增時間、細(xì)胞周期時間。

【細(xì)胞核型分析】檢測核型特點,染色體數(shù)量、標(biāo)記染色體的有無、帶型等。

【凝集試驗】檢測凝集力。

【軟瓊脂培養(yǎng)】檢測集落形成能力。

【異體動物接種】向異體動物體內(nèi)(皮下)接種細(xì)胞懸液,觀察成瘤能力。

【其它】除上述項目外,根據(jù)需要還可做同位素標(biāo)記、組織化學(xué)成分分析,熒光顯微鏡觀察等。

在上述腫瘤細(xì)胞生物學(xué)檢測中,zui主要的為:異體動物(以用裸鼠為上)接種成瘤、軟瓊脂培養(yǎng)、核型分析、腫瘤細(xì)胞骨架和電鏡觀察等幾項。當(dāng)然從分子細(xì)胞學(xué)角度考慮尚應(yīng)做癌基因和抗癌基因等的檢測,這些項目將在本書第二篇中介紹。

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