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小鼠血管/內皮成纖維抑制劑培養細胞培養操作規程

時間:2022/3/1閱讀:342
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小鼠血管/內皮成纖維抑制劑培養細胞培養操作規程:

一.培養基及培養凍存條件準備:

1)準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優質胎牛血清,10%。

2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,吹打均勻后,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進行凍存。

延伸因子EF-1δ抗體大鼠骨織素(Ostn)ELISA Kit

延伸因子EF-1 γ抗體大鼠骨形態形成蛋白拮抗蛋白ELISA Kit

磷酸化真核翻譯延長因子2抗體大鼠骨特性堿性磷酸酶C端肽ELISA Kit

磷酸化真核延伸因子激酶2抗體大鼠骨鈣素(OT)ELISA Kit

纖連蛋白4抗體大鼠骨成型蛋白3(BMP-3)ELISA Kit

延伸因子結合蛋白EFTUD2抗體大鼠谷胱甘肽還原酶(GR)ELISA Kit

表皮生長因子樣蛋白6抗體大鼠谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)ELISA Kit

磷酸酶/磷酸二酯酶家族成員6抗體大鼠谷胱甘肽S轉移酶θ1(GSTT1)ELISA Kit

核苷轉運蛋白ENT1抗體大鼠谷胱甘肽S轉移酶P(GSTP1)ELISA Kit

核苷轉運蛋白ENT2抗體大鼠谷胱甘肽S轉移酶Mu1(GSTM1)ELISA Kit

鳥嘌呤核苷酸交換因子4大鼠谷胱甘肽S轉移酶(GSTs)ELISA Kit

磷酸化紅細胞膜條帶4.1蛋白抗體大鼠谷氨酰銨合成酶(GLUL)ELISA Kit

磷酸化酪氨酸蛋白激酶受體B1抗體大鼠谷氨酰銨(Gln)ELISA Kit

蛋白激酶受體B1+B2抗體大鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)ELISA Kit

磷酸化神經細胞鳥苷酸置換因子Ephexin1抗體大鼠谷氨酸脫羧酶自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)ELISA Kit

磷酸化Ephrin B抗體大鼠谷氨酸脫羧酶1(GAD1)ELISA Kit

惡性腫瘤丟失蛋白EPLIN抗體大鼠谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)ELISA Kit

磷酸化紅細胞生成素受體抗體大鼠谷氨酸ELISA Kit

磷酸化HER2受體抗體大鼠鉤端螺旋體IgG(Leptospira IgG)ELISA Kit

磷酸化HER2受體抗體大鼠高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)ELISA Kit


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