DMSO是目前常用的細胞凍存保護劑,一般使用時終濃度控制在5~10%,最佳濃度取決于細胞類型。
一般來說,存活率比較高的細胞系,培養基、血清、DMSO按照7:2:1的比例新鮮配制使用。
細胞計數后,用配制好的細胞凍存液重懸細胞,至5×10^6 ~ 1×10^7 cells/mL,然后1~1.5mL/管分裝凍存。
對于存活率較低的細胞系,或者需要長時間保存的細胞系,可以增加凍存液中的血清濃度,血清和DMSO按9:1的比例配制。
另外,還有商品化的無血清凍存液可以選擇,不需要預先配制。一般會含有多種保護劑成分,適用于特別珍貴的細胞的保存,例如干細胞、分離后的免疫細胞等等。
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