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如何規(guī)范的操作無菌取樣

時間:2022-8-17閱讀:985

抽樣操作是整個實(shí)驗(yàn)室檢測流程的第一步,也是首先應(yīng)當(dāng)保證的重要環(huán)節(jié)。經(jīng)常會有這樣的情況:樣品檢測結(jié)果出現(xiàn)異常,我們排查了檢測流程的方方面面都沒有出現(xiàn)偏差,結(jié)果是樣品在抽樣時已經(jīng)被污染。這樣的情況事實(shí)上并不鮮見,如何杜絕呢?還得從規(guī)范抽樣操作開始。由于不同類型的樣品應(yīng)采取不同的抽樣操作,為了使抽樣更加科學(xué),下面針對不同樣品的抽樣操作進(jìn)行分類闡述。

液體樣品:

一般情況下,液體樣品比較容易獲得代表性樣品。液態(tài)食品一般盛放在大罐中,取樣時可連續(xù)或間歇攪拌。對于較小的容器,可在取樣前將液體上下顛倒,使其*混勻。取得的樣品應(yīng)放在已滅菌的容器中送往實(shí)驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)室在取樣檢測之前應(yīng)當(dāng)把液體再*混勻一次。

固體樣品:

根據(jù)所取樣品材料的不同,所使用的的工具也不同。固態(tài)樣品常用的取樣工具有解剖刀、勺子、軟木鉆、鋸、鉗子等,使用前均須滅菌。例如面粉或奶粉等已經(jīng)混勻的食品,其成分質(zhì)量均勻穩(wěn)定,可以抽取少量樣品檢測。但散裝樣品就必須從多個點(diǎn)取樣,且每個點(diǎn)都要單獨(dú)處理,在檢測前要*混勻。肉類、魚類或類似食品既要在表皮取樣,又要在深層取樣,深層取樣時要小心不要被表面污染。有些食品,如新鮮肉類或熟肉可用滅菌的解剖刀和鉗子取樣;冷凍食品在不解凍的狀態(tài)下用鋸、木鉆或電鉆,一般斜角鉆入來獲得深層樣品;粉末狀樣品取樣時,可用滅菌的取樣器斜角插入箱底,樣品填滿取樣器后提出箱外,再用滅菌勺從取樣器的上、中、下部位采樣。

水樣:

取水樣時,最好選用帶有防塵磨口瓶塞的廣口瓶。對于氯氣處理過的水,取樣后在100mL水樣中加入0.1mL的2%的硫代硫酸鈉溶液。取樣時應(yīng)特別注意防止樣品的污染,樣品應(yīng)*地充滿取樣瓶。如果樣品時從水龍頭上取得,龍頭嘴的里外都應(yīng)擦干凈。打開水龍頭讓水流幾分鐘,關(guān)上水龍頭并用酒精燈灼燒,再次打開水龍頭讓水流1-2min后再接樣并裝滿取樣瓶。這樣的取樣方法能確保供供水系統(tǒng)的細(xì)菌學(xué)分析的質(zhì)量,但如果檢測的目的是用于追蹤微生物的污染源建議還應(yīng)在水龍頭滅菌前取樣會在龍頭的里外用棉拭子涂抹取樣,以檢測水龍頭自身污染的可能性。從水庫、池塘、井水、河流等取水樣時,用無菌的器械或工具拿取瓶子和打開瓶塞,在流動水中取樣品是瓶嘴應(yīng)直接對著水流。大多數(shù)國家的取樣程序中已明確規(guī)定了取樣所用器械,如果不具備適當(dāng)?shù)娜觾x器或臨時取樣工具,只能用手操作,但取樣時,應(yīng)特別小心,防止用手接觸水樣或取樣瓶內(nèi)部。

帶包裝食品:

直接食用的小包裝食品盡可能取原包裝,直到檢測前不要開封防止污染;桶裝或者大容器包裝的液體或固體食品應(yīng)用無菌取樣器由幾個不同部位采取,一起放入一個滅菌容器內(nèi),不要過度潮濕,以防食品中固有的細(xì)菌繁殖;對于桶裝或大容量包裝的冷凍食品,應(yīng)從幾個不同的部位用滅菌工具抽樣,使之有充分的代表性,將樣品送達(dá)實(shí)驗(yàn)室前,要始終保持樣品處于冷凍狀態(tài)。若樣品一旦融化,不可使其再冷凍,保持冷卻即可。

表面采樣:

通過惰性載體可以將表面樣品上的微生物轉(zhuǎn)移到合適的培養(yǎng)基中進(jìn)行微生物檢測,這陣惰性載體既不能引起微生物的死亡,也不應(yīng)使其增殖。這樣的載體包括清水、拭子等。要達(dá)到微生物既不死亡又不增殖很困難,因此取樣后應(yīng)當(dāng)盡快進(jìn)行檢測。表面取樣技術(shù)只能直接轉(zhuǎn)移菌體,不能做系列稀釋,只有在菌體數(shù)量較少的時候適用,其最大的優(yōu)點(diǎn)是取樣過程不破壞樣品。常用的表面取樣技術(shù)包括棉拭子、淋洗法、膠帶法等,這里以棉拭子法為例。定性檢測時,只要涂抹全部需要檢測的表面即可。而進(jìn)行的定量檢測時,必須先用滅菌取樣框確定被測試的區(qū)域。用干燥的棉花纏在4cm長,直徑1-1.5mm的木棒或不銹鋼棒上做成棉拭子(為了方便也可使用一次性棉簽),放進(jìn)合金試管中,蓋上蓋子后滅菌。取樣時先將拭子在稀釋液中浸濕,然后再待測樣品表面緩慢旋轉(zhuǎn)拭子平行用力涂抹兩次。涂抹過程中應(yīng)保證拭子在取樣框內(nèi)。取樣后拭子重新裝回有10mL取樣溶液的試管中。

以上就是各種情況下無菌抽樣的操作要求。無菌抽樣的規(guī)范性是保證樣品檢測準(zhǔn)確性的前提,因此我們在取樣時應(yīng)規(guī)范操作,確保從源頭杜絕污染。

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