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蒂科(上海)生物科技有限公司

胰酶在細(xì)胞培養(yǎng)中起到什么作用

時(shí)間:2022-8-1閱讀:1809

胰蛋白酶的作用是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細(xì)胞離散。不同的組織或者細(xì)胞對胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細(xì)胞的活性還與其濃度、溫度和作用時(shí)間有關(guān),在 pH 為 8.0 、溫度為 37℃ 時(shí),胰酶溶液的作用能力強(qiáng)。使用胰酶時(shí),應(yīng)把握好濃度、溫度和時(shí)間,以免消化過度造成細(xì)胞損傷。因 Ca2+ 、 Mg2+ 和血清、蛋白質(zhì)可降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液時(shí)應(yīng)選用不含 Ca2+ 、 Mg2+ 的 BSS ,如: D-Hanks 液。終止消化時(shí),可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對細(xì)胞的作用。

1. 稱取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液濃度為 0.25 %,用電子天平準(zhǔn)確稱取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水(若用雙蒸水需要調(diào) PH 到 7.2 左右)或 PBS ( D-hanks )液中。攪拌混勻,置于 4℃ 內(nèi)過夜。

2. 用注射濾器抽濾消毒:配好的胰酶溶液要在超凈臺(tái)內(nèi)用注射濾器( 0.22 微米微孔濾膜)抽濾除菌。

3. 分裝成小瓶于 -20℃ 保存以備使用可!

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