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蒂科(上海)生物科技有限公司

支原體污染對細胞培養的危害!

時間:2022-3-3閱讀:1029

1.支原體污染的普遍性

支原體污染是細胞培養領域遇到的性問題,據文獻報道,綜合美國食品藥品監督管理局(FDA)、美國模式菌種收集中心(ATCC)等機構收到的相關數據,世界各國細胞系支原體污染的平均比例為30-60%。該數據未統計中國大陸的數據,但可以確定,大陸地區的支原體污染比例與此相當,或更嚴重。

2.支原體污染的危害

根據已發表的支原體污染研究文獻,支原體污染細胞后,幾乎能影響每一個細胞參數。

1)支原體污染可能導致細胞染色體的異常和損傷,改變細胞的代謝、生長、形狀、附著。

2)支原體影響被污染細胞的基因表達。相關研究表明,支原體污染的細胞系與對照組比較,有多達200個基因表達差異達2倍以上。

3)導致MTT等細胞毒性實驗結果嚴重錯誤。支原體對MTT有額外還原作用。

4)支原體污染能耗盡營養物,促進代謝積累,重度支原體污染導致pH改變。

5)誘導或抑制細胞因子表達,并改變培養細胞的代謝、增殖特征及形態。支原體污染可以直接影響L-arginine的代謝

6)支原體污染可以誘導樹突狀細胞成熟,這對于開展人體免疫細胞的腫瘤治療的影響將是災難性的。

3.支原體污染的隱蔽性

支原體大小約0.1-0.6微米,體積比病毒稍大,輕度到中度的支原體污染不會明顯改變細胞培養液的渾濁度和pH值,也不會導致細胞形態或生長速度的明顯改變,所以科研人員很難及時發現體外培養的細胞已經被支原體污染,進而改變了基因表達譜,顯示虛假的實驗數據和實驗結果。通常情況下,如果不排除支原體污染因素,很多實驗結果往往缺乏說服力。2013年,Ding級期刊《Nature》明確要求,在涉及細胞培養的科研工作中,必須進行支原體檢測,并排除其影響。

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