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葡聚糖酶(纖維素酶)檢測底物使用說明書

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更新時間:2024-11-20 13:28:47瀏覽次數:1415次

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供貨周期 現貨 應用領域 農林牧漁,能源
1.原理
該方法用于特異性檢測纖維素酶制劑中的葡聚糖酶(內切纖維素酶)。孵育染色的纖維素和纖維素酶,底物通過內部作用被解聚產生低分子量的染色片段,之后在反應混合物中加入沉降劑,通過離心方法去除大分子量物質,測定上清液的顏色,參照標準曲線可以確定分析溶液中的內切纖維素酶。

2.底物
底物采用的是部分解聚的染色的羧甲基纖維素-4M,用藍色染料R染色多聚糖,大約1個染料分子連接20個糖基。

3.溶解

1.原理

該方法用于特異性檢測纖維素酶制劑中的葡聚糖酶(內切纖維素酶)。孵育染色的纖維素和纖維素酶,底物通過內部作用被解聚產生低分子量的染色片段,之后在反應混合物中加入沉降劑,通過離心方法去除大分子量物質,測定上清液的顏色,參照標準曲線可以確定分析溶液中的內切纖維素酶。

2.底物

底物采用的是部分解聚的染色的羧甲基纖維素-4M,用藍色染料R染色多聚糖,大約1個染料分子連接20個糖基。

3.溶解

2g粉狀底物加入到帶加熱板和磁力攪拌棒攪拌的80mL劇烈沸騰的水中,之后關閉加熱板,繼續攪拌直到溶液/漿液勻質(大約20分鐘),再加入5mL乙酸鈉緩沖液(2MpH4.5),冷卻溶液到室溫。調節pH4.5,定容到100mL。該溶液可以儲存在4℃下,在此條件下,并且不被內切纖維素酶污染時,該溶液可以穩定保存至少12個月。下次使用前,劇烈震蕩儲存瓶子將底物溶液混合。該溶液是粘性的,應用容積式移液器移取(如Eppendorf Multipette® with a 5.0 mL Combitip)。





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