_{血藥濃度檢測的三大技術方法}

血藥濃度系指藥物吸收后在血漿內的總濃度，包括與血漿蛋白結合的或在血漿游離的藥物，有時也可泛指藥物在全血中的濃度。藥物作用的強度與藥物在血漿中的濃度成正比，藥物在體內的濃度隨著時間而變化。目前監測方法主要是液相色譜法。

一、臨床的作用與意義

臨床實踐中常常發現這樣一種現象，同樣劑量的藥物，用于患同種疾病的不同病人，其療效往往相差很大，有的表現為yao到病除，恰到好處；有的療效一般，病況稍見好轉；而有的卻療效不好。其毒副作用表現也不一樣，有的幾乎*或輕微；有的卻嚴重中毒。這是因為存在著個體差異，如：年齡、性別、機體狀況、遺傳、種族等不同差異。例如，用苯妥英鈉治療驚厥和心律失常，其適治療劑量在不同的人身上變化很大。用常用量治療時，其血藥濃度變動較大，有的人低到只有2毫克/升，根本無療效;有的人卻高達50毫克/升，病人嚴重中毒。

為了做到合理用藥，科學家們做了大量實驗，發現這樣一個有意義的現象：不同的人，其有效的藥物劑量變動很大，但是其安全有效的血藥濃度變動卻較小。一般不過1倍左右。當血藥濃度大于安全有效范圍，其毒副作用和表現及其程度在不同病人身上變動也較小。再舉苯妥英鈉的例子，該藥的安全有效血濃度范圍在幾乎所有病人均為10～20毫克/升。同樣當苯妥英鈉的血濃度超過安全范圍，幾乎所有病人都出現中毒反應。當血藥濃度為20～30毫克/升時，病人則出現精神異常現象。

對那些有效濃度與中毒血濃度比較接近的藥物（如洋地黃類），以及對那些長期用藥或合并用藥的病人，為防止藥物在體內濃度過高而產生毒副作用，應該經常測定血藥濃度。

如今，一些有條件的醫院對病人除掌握藥物的劑量和給藥的次數以外，還常常測定血藥濃度，以便指導臨床選擇適合不同個體的*治療方案和zui合適的治療劑量。

二、監測方法

目前血藥濃度監測的方法雖然很多，但常用的有光譜法、色譜法、免疫法三大類 。

1.光譜法

該類方法有比色法、紫外-可見分光光度法、熒光法等。這類方法靈敏度比較低，只能監測體液中藥物質量濃度在1.0μg·L-1以上的藥物，并且代謝物或結構相近化合物對監測的干擾較大。在所查文獻中，采用雙波長紫外分光光度法監測血中氨茶堿濃度的小檢測限為0.5μg·mL-1，苯妥英鈉的低檢測限為5μg·mL-1。盡管采用差示分光光度法、導數分光光度法等來提高方法的專一性，減少了雜質的干擾，但并不能提高該類檢測方法的靈敏度。另外，應用這類方法所需樣品量大，尤其象差示分光光度法所需樣品量更大。以上缺點限制了該類方法在血藥濃度監測中的應用。尤其近年來色譜技術的發展，使得光譜法因其靈敏度、特異性等局限而使得其應用逐漸減少。但對于藥物濃度較高的體液樣品或樣品量較大的樣品，該類方法仍是經濟、簡便、快捷的監測方法。該方法目前已很少使用了。

2.色譜法

色譜法目前是發展快、適用性zui強的一種方法，發展前途的方法。這類方法較光譜法大的優勢就是它不僅具有*的定量作用，更具有一次分離多種樣品的作用，加之這種方法靈敏度高，能夠測到的藥物質量濃度可達0.001～1μg·mL-1，尤其是近年來質譜的發展使得監測范圍更加擴展，達到1.0×10-9～1.0×-6μg·mL-1甚至更低。

液相色譜(HPLC)法

HPLC法是目前臨床上用于監測血藥濃度常用、有前景的方法，在所查文獻中，采用HPLC法監測抗癲癇藥物的血藥濃度在所有方法中達到80%以上。這種方法檢測靈敏度、精密度高，專一性強。并且HPLC法應用范圍廣，可用于藥物研究的很多領域，目前已越來越普及，但這種方法對樣品的前處理要求非常高，主要是因為色譜柱做為分離、分析樣品的重要載體，對進行分析的樣品純凈度要求非常高，大分子蛋白質及其他大分子物質必須處理*，以zui大程度地減少對分析柱的柱效的影響，延長色譜柱的使用時間。

HPLC操作費時，費用相對較高。目前針對色譜及光譜分析中樣品處理繁瑣的難題，已有色譜工作人員成功開發出了在線凈化富集生物體液的填料柱，在進行樣品監測時無需預處理，蛋白質等大分子物質經洗脫而不被保留，而小分子物質可自由出入于固定相的疏水部分而得到分析。這一方法省時省力，近年來國內外在HPLC系統中已廣泛采用SPE柱從而使得體液分析方法大為簡化，但這種處理增加了樣品監測的成本。液-質聯用技術的發展為樣品分析提供了廣闊的空間，質譜的聯用為色譜的進一步發展提供了更為靈敏、準確的技術支持，在很大程度上擴展了液相色譜的應用范圍，如監測血清中替米沙坦的濃度時，單用液相色譜法監測時，低檢測限為20μg·L-1，但當應用液-質聯用進行監測時，可將靈敏度提高到0.5μg·L-1。

3.免疫法

目前采用免疫法監測藥物濃度主要是利用蛋白競爭的原理進行監測的。目前放射免疫法，酶免疫法、熒光免疫法是較常用于血藥濃度監測的方法，國外監測血藥濃度多以熒光偏振免疫法(FPIA法)、均相酶免疫法(EMIT)為主，這類方法樣品處理簡單，獲取結果時間較短，已成為臨床用于評判療效的一個重要依據。該類儀器多由國外研發，價格較貴，且僅局限于其研發后所能監測的藥物。但該類儀器仍因其獲取結果快速、樣品處理簡單、靈敏度高而受到臨床的重視。目前也不是主要使用方法了。