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美德聲利什曼原蟲 IgM 抗體檢測試劑盒
美德聲利什曼原蟲 IgM 抗體檢測試劑盒是一種用于篩查內臟利什曼病（VL）患者血清中 IgM 抗體的酶聯免疫吸附試驗（ELISA）試劑盒。內臟利什曼病是一種由利什曼原蟲復合體（L. donovani）引起的嚴重疾病，具有較高的死亡率。該病主要通過沙蠅傳播，狗是主要的感染宿主。內臟利什曼病在許多國家流行，尤其在發展中國家，隨著城市化進程的加快，該病已成為一個嚴重的問題。該病在拉丁美洲、東非、中東、印度和中國部分地區發病率較高，地中海沿岸國家如意大利、法國南部、西班牙、葡萄牙和北非也有流行。在南歐，內臟利什曼病已成為艾滋病患者的首要機會性感染疾病。
檢測原理
在初次孵育過程中，患者血清中的抗體與測試孔中的抗原結合。第二次孵育使抗原 - 抗體復合物與酶復合物結合。經過洗滌去除未結合的酶后，加入顯色劑，在酶復合物和過氧化物的存在下產生藍色。終止液結束反應，將藍色變為黃色。
試劑組成
測試條：含有利什曼原蟲抗原的微孔板，共 96 個測試孔，置于測試條架中。
酶結合物：1 瓶，含 11 ml 抗人 IgM（μ 鏈）過氧化物酶（HRP），置于含有硫柳汞的穩定緩沖液中。
陽性對照：1 瓶，含 2 ml 稀釋的替代陽性，置于含有硫柳汞的緩沖液中。
陰性對照：1 瓶，含 2 ml 稀釋的利什曼原蟲陰性人血清，置于含有硫柳汞的緩沖液中。
顯色劑：1 瓶，含 11 ml 四甲基聯苯胺（TMB）。
洗滌濃縮液（20X）：2 瓶，每瓶含 25 ml 濃縮緩沖液和表面活性劑。
稀釋緩沖液：2 瓶，每瓶含 30 ml 緩沖蛋白溶液。
終止液：1 瓶，含 11 ml 1 M 磷酸。
樣本處理
將血液凝固后分離血清。如果樣本不立即使用，應冷凍于 -20℃或更低溫度。避免樣本加熱滅活以及反復凍融。
結果解讀
# 分光光度計讀取
將酶聯免疫吸附試驗讀取器歸零于空氣中。使用 450 nm 和 620-650 nm 的濾光片進行雙波長讀取所有微孔。陽性 - 吸光度讀數大于或等于 0.2 OD 單位。陰性 - 吸光度讀數小于 0.2 OD 單位。
# 視覺讀取
如果顏色變化明顯且顯著，樣本應被解釋為陽性。
產品局限性
血清學結果應作為診斷的輔助手段，不應單獨解釋為診斷結果。盡管目前尚未記錄到特定的交叉反應，但不能排除類似生物體的反應。
質量控制
使用陽性和陰性對照可輕松驗證試劑盒的穩定性。對于有效的測試，陽性對照必須超過 0.3 OD 單位，陰性對照必須低于 0.1 單位。如果這些值超出這些范圍，則不應使用該試劑盒。
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