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原理

使用液相色譜法分析電離能力比較強(qiáng)的樣品時(shí)，樣品在反相色譜柱上的保留時(shí)間很短或者根本不保留，這時(shí)要加入相應(yīng)的離子對(duì)試劑，將分析物上的離子進(jìn)行結(jié)合，形成在柱子上有保留的分子。

離子對(duì)試劑種類

離子對(duì)試劑的種類和濃度對(duì)分離效果都有較大的影響。離子對(duì)試劑種類的選擇依賴于被分離樣品的性質(zhì)。

● 被分離溶質(zhì)是強(qiáng)酸或強(qiáng)堿，離子對(duì)試劑可以是強(qiáng)酸或強(qiáng)堿，弱堿或弱酸。

● 被分離的溶質(zhì)是弱酸或弱堿，則選用的離子對(duì)試劑必須是強(qiáng)堿或強(qiáng)酸。

● 對(duì)于溶質(zhì)結(jié)構(gòu)性質(zhì)相差較大的混合樣品，離子對(duì)試劑種類的選擇并沒有特殊要求。

● 離子對(duì)試劑疏水性的差別可以通過調(diào)節(jié)離子對(duì)試劑濃度和有機(jī)溶劑濃度獲得滿意的分離效果。

1. 用于酸性化合物：四丁基氫氧化銨（10%水溶液） 、四丁基溴化銨、十二烷基三甲基氯化銨。

2. 用于堿性化合物：戊烷磺酸鈉、己烷磺酸鈉 、庚烷磺酸鈉、辛烷磺酸鈉、癸烷磺酸鈉。

3. 其他離子對(duì)試劑：高氯酸鈉、三氟yi酸、七氟丁酸等。

常用離子對(duì)試劑 CAS號(hào)：

1-戊烷磺酸鈉 CAS:22767-49-3

1-己烷磺酸鈉 CAS:2832-45-3

1-庚烷磺酸鈉 CAS:22767-50-6

1-辛烷磺酸鈉 CAS:5324-84-5

1-癸烷磺酸鈉 CAS:13419-61-9

離子對(duì)試劑選用步驟

1．選擇一根適合的色譜柱，常為C18柱。

2．準(zhǔn)備流動(dòng)相時(shí)僅使用HPLC級(jí)別的水和色譜級(jí)試劑。

3．選擇能給出最佳分離度的流動(dòng)相成分和濃度。

4．如果樣品中有非離子化物質(zhì)，在嘗試離子化分離之前首先優(yōu)化分離情況。

5．選擇合適的離子對(duì)系列試劑以提供相應(yīng)的離子配對(duì)：對(duì)于酸性分析物使用酸性離子對(duì)試劑；對(duì)于堿性分析物使用堿性離子對(duì)試劑。

6．通過比較選擇所得分離度zui 好的離子對(duì)試劑。

7．一旦離子對(duì)試劑已經(jīng)確定，調(diào)節(jié)流動(dòng)相的pH值將分離度zui大化；因?yàn)槲⑿〉膒H值改變對(duì)保留性質(zhì)和選擇性都有較大的影響，所以仔細(xì)的小幅度調(diào)節(jié)pH值。

8．理想狀況下，流動(dòng)相中的離子對(duì)試劑濃度應(yīng)為0.005M，但是稍微增加離子對(duì)試劑可能會(huì)稍微增加保留性質(zhì)并因此優(yōu)化分離情況。