色譜分析的重要作用之一是對樣品進行定量，色譜定量的依據(jù)是：組分的重量或濃度與檢測器的響應(yīng)信號成正比。選擇合適的定量方法時，除需要考慮相對定量還是絕對定量外，同時也需要考察化合物的線性響應(yīng)范圍、是否有合適內(nèi)標(biāo)、是否有標(biāo)準(zhǔn)品等。常見的定量方法有內(nèi)標(biāo)法、外標(biāo)法、面積歸一法、加校正因子的主成分自身對照法與不加校正因子的主成分自身對照法等。本文將對zui常用的內(nèi)標(biāo)法、外標(biāo)法、面積歸一法三種方法進行介紹。
內(nèi)標(biāo)法
內(nèi)標(biāo)法是將一定重量的純物質(zhì)作為內(nèi)標(biāo)物加到一定量的被分析樣品混合物中，根據(jù)測試樣和內(nèi)標(biāo)物的質(zhì)量比及其相應(yīng)的色譜峰面積之比及相對校正因子，來計算被測組分的含量。
精密稱（量）取對照品和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)，分別配成溶液，各精密量取適量，混合配成校正因子測定用的對照溶液。取一定量進樣，測量對照品和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積，計算校正因子。
再取按標(biāo)準(zhǔn)制備中含內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的供試品溶液，進樣，測量供試品中待測成分和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積，再計算含量（其中Ax：供試品圖中待測成份峰面積；A`S: 供試品圖中內(nèi)標(biāo)物峰面積；C`S：供試品圖中內(nèi)標(biāo)物濃度）。
內(nèi)標(biāo)物的選擇要求：
a
原樣品中不含組分；
b
與待測物保留時間應(yīng)接近，但不重疊；
c
為高純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，或含量已知物質(zhì)；
d
在給定色譜條件下具有一定化學(xué)穩(wěn)定性。
外標(biāo)法
外標(biāo)法是用待測組分的純品作對照物質(zhì)，以對照物質(zhì)和樣品中待測組分的響應(yīng)信號相比較進行定量的方法。它不是把標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)加入到被測樣品中，而是在與被測樣品相同的色譜條件下單獨測定，把得到的色譜峰面積與被測組分的色譜峰面積進行比較求得被測組分的含量。此法可分為外標(biāo)一點法與標(biāo)準(zhǔn)曲線法。
標(biāo)準(zhǔn)曲線法：是用對照物質(zhì)配制一系列濃度的對照品溶液確定工作曲線，求出斜率、截距。在*相同的條件下，準(zhǔn)確進樣與對照品溶液相同體積的樣品溶液，根據(jù)待測組分的信號，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出其濃度，或用回歸方程計算，工作曲線法也可以用外標(biāo)二點法代替。
外標(biāo)一點法：是用一種濃度的對照品溶液對比測定樣品溶液中組分的含量。
精密稱（量）取對照品和供試品，配制成溶液，分別精密稱取一定量，進樣，測量對照品溶液和供試品溶液中待測物質(zhì)的峰面積（或峰高）來進行計算：
如標(biāo)準(zhǔn)中有系統(tǒng)適用性要求，首先需確認(rèn)系統(tǒng)溶液能滿足條件，否則檢測無效。一般要求對照品配制兩份，一份連續(xù)進5針以計算RSD，如無特殊要求，RSD不超過2%。符合了，說明系統(tǒng)沒問題，再進行后面的實驗。樣品也同樣需要配制兩份，兩份樣品最終結(jié)果的RSD同樣不能超過2.0%。
面積歸一法
由于組分的量與其峰面積成正比，按各品種項下的規(guī)定，配制供試品溶液，取一定量進樣并記錄色譜圖，測得各峰的峰面積和色譜圖上除溶劑峰以外的總色譜峰面積，計算各峰面積占總峰面積的百分比。
計算公式：
總雜（%）=1-主成分峰面積百分比
單雜峰直接從積分結(jié)果表中讀取即可
此法結(jié)果很不準(zhǔn)確，一般在工藝研究、原料合成過程中的中間體等中用來檢測大致數(shù)據(jù)做參考用。
(空格分隔,最多3個,單個標(biāo)簽最多10個字符)
10
立即詢價
您提交后，專屬客服將第一時間為您服務(wù)