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保留時間漂移的影響因素不僅僅是流動相

閱讀:2337      發布時間:2021-12-29
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微信截圖_20211229135152.png

我們在做液相色譜的時候,多多少少都會碰到一些問題,比如:峰保留時間漂移。這是個令人頭疼的問題,引起峰保留時間漂移的因素有很多,比如流動相是否充分平衡、流動相體系和固定相的選擇是否合適、是否存在溶劑效應等,當排除這些影響,而問題依然存在的情況下,該如何解決呢?

來看一個案例:

枸櫞酸類化合物,易溶于水,在反相C18柱上以酸性體系作流動相,峰保留及峰型情況良好,但隨著進樣次數的增多,峰保留時間呈不斷前移狀態。


如圖1所示:


微信截圖_20211229135231.png

調整流動相及更換色譜柱,該現象依然存在


如圖2所示:


微信截圖_20211229135326.png

調整流動相,更換色譜柱,問題依然存在,說明導致該現象的產生并非因為流動相體系或色譜柱原因造成,初步推斷問題出自樣品本身。

分析該物質結構,為酸性化合物,以水作為它的溶樣溶劑時,無法很好的保持它的分子狀態,因為水的pH值偏中性,甚至是偏弱堿性,在這樣的環境下,化合物中的生色團受到與其相連的分子中其他部分的影響以及溶劑的影響,使得它的吸收峰位置發生移動,導致樣品溶解后的狀態不夠穩定,故我們需要改善它的溶液穩定性。

以流動相(pH3.0)做溶樣溶劑,峰保留時間漂移問題有改善,但效果還不夠理想。


如圖3所示:


微信截圖_20211229135409.png

改用磷酸水(pH2.0)作溶樣溶劑,

峰保留時間漂移問題得以解決。


如圖4所示:


微信截圖_20211229135440.png

 結論


1

峰保留時間的影響因素不僅僅是流動相、固定相等,當這些外在的影響因素排除后,仍然存在RT漂移問題,可從樣品自身角度出發考慮問題。

2

樣品溶解后的狀態,關乎到樣品的保留時間、峰面積的穩定性及峰型是否良好等問題,溶劑選擇的時候,需充分考慮這方面的因素。



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