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Flash柱

對(duì)于有機(jī)合成和藥物化學(xué)而言，前期往往需要篩選大量的潛在化合物，一旦發(fā)現(xiàn)相關(guān)活性化合物之后，就需要將這一具有高附加值的化合物純化出來(lái)，在這個(gè)過程中，選擇Flash柱進(jìn)行純化是很常用的方法。

常規(guī)Flash柱填料量從小到4g，大到330g，大大小小有數(shù)種，那該如何選擇合適規(guī)格的Flash柱呢，這主要取決于你的樣品上樣量。

在分離純化過程中，上樣量是關(guān)注的參數(shù)。在制備純化中上樣量通常指在確保純度和收率的條件下為了提高效率、降低耗材使用成本而得到的大制備樣品量。

上樣量的定義

在制備純化中，上樣量可以細(xì)化為兩類：理論大上樣量和有效大上樣量。

理論大上樣量指的是不考慮任何分離因素的影響，僅僅考慮填料對(duì)樣品的承受能力。對(duì)于不同種類的色譜填料，因?yàn)榛|(zhì)不同，鍵合相不同，分離作用原理不同，造成單位重量的填料對(duì)樣品的分離能力也有所差異。例如z常見的裸硅膠填料和C18硅膠填料，鍵合相分別是硅醇基團(tuán)和C18。通常裸硅膠的理論大上樣量是硅膠量的1/10， C18硅膠填料的理論大上樣量是填料量的1/50。

而在實(shí)際使用中，樣品的分離度，樣品的溶解度都會(huì)影響我們上樣情況。因此實(shí)際上我們?cè)谌粘Ｖ刑岬降姆蛛x度更多指的是有效大上樣量。

分離度和溶解度對(duì)上樣量的影響主要決定是否要超載進(jìn)樣和超載進(jìn)樣的方式。

首先是分離度，當(dāng)目標(biāo)物和雜質(zhì)分離度很高，可以加大進(jìn)樣量。隨著進(jìn)樣量的加大，分離度變小，直到會(huì)影響到分離純化收率和純度要求。如果分離度不好就降低上樣量。因此分離度決定是否要采取超載進(jìn)樣。

其次是溶解度，它決定了超載進(jìn)樣的方式。樣品溶解性好，則s選濃度超載。進(jìn)樣體積不變，增加樣品濃度，樣品峰從對(duì)稱高斯峰形轉(zhuǎn)變成三角形，峰展寬較小，分離效果好。樣品溶解性差，則選擇體積超載。增加進(jìn)樣體積，峰高穩(wěn)定，峰形變寬，成平頭峰。但是選擇體積超載會(huì)存在樣品析出風(fēng)險(xiǎn)。

 圖1 不同進(jìn)樣方式和色譜峰形

如何根據(jù)上樣量選擇Flash柱或者根據(jù)已有Flash柱規(guī)格選擇上樣量

各位小伙伴如果無(wú)法直接判斷上樣量或選擇柱子規(guī)格，可以選擇月旭WelFlash中低壓制備色譜柱使用說明書中列出的Flash柱規(guī)格和樣品上樣量作為參考。

圖2 WelFlash 說明書推薦上樣量

月旭科技研發(fā)生產(chǎn)高性能的色譜填料，提供高品質(zhì)HPLC分析柱和制備柱，旨在為您解決各種分離純化應(yīng)用難題。本公司的WelFlash中低壓制備色譜柱有全多孔球形硅膠、無(wú)定型硅膠、氧化鋁、聚苯乙烯-二乙烯基苯（PSDVB）等多種基質(zhì)，鍵合相種類豐富。采用聚丙烯柱體，堅(jiān)固耐用，支持多次使用，具有標(biāo)準(zhǔn)的Luer-Lock進(jìn)液口和出液口，兼容多種快速制備系統(tǒng)。

圖3 WelFlash 中低壓制備色譜柱

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