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ai-先藍-糖原(AB-PAS)染液的染色原理

時間:2023/12/5閱讀:911
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ai-先藍-糖原(AB-PAS)染液的染色原理

AB-PAS Stain

染se原理

中性粘液物質(zhì)含有氨基己糖基,酸性粘液物質(zhì)也含有氨基己糖,并含有各種酸根。前者多見于冒粘膜的表面上皮,十二指腸腸腺、領(lǐng)下腺和前列腺上皮等:后者多見于呼吸道和消化道的杯狀細胞、主動脈壁、軟骨基質(zhì)、角膜和皮膚等。胃粘膜表面上皮分泌中性粘液,而胃的腸腺化生或腸型胃癌細胞分泌酸性粘液,但胃型胃癌的癌細胞則分泌中性粘液。這二種粘液在蘇木素-伊紅染se時較難區(qū)分,而用(AB-PAS)染se時酸性粘液可被先藍染為藍se,中性粘液則可被 PAS染為紅-se。

試劑組成

存條件及有效

室溫密封保存,有效期為 12 個月。試劑二和試劑三應(yīng)用液若本次實驗未用完,需-20C

箱冷凍避光保存。下次實驗臨用前,需平衡到室溫再使用。

樣本處理

石蠟切

脫蠟:石蠟切片在脫蠟劑中脫蠟 2 (最好在 37C氣浴箱中進行),每次 10~15 分鐘。(

所有無毒環(huán)保拖拉機供應(yīng))

梯度入水: 95%、70%30%乙醇各2 分鐘,蒸餾水2 分鐘

染se步驟

玻片法:

1.蒸餾水稍洗樣本,滴加ai先藍染液染se10~20 分鐘,水洗 30 秒左右;

2.將高碘酸染液滴加在玻片的樣本上,使其全部覆蓋樣本,將此玻片輕輕平放于染se架上,

室溫孵育 10 分鐘。

3. 取出染se玻片,蒸餾水洗玻片2~3 分鐘。

4.玻片未干透前,滴加雪夫試劑于玻片樣本上,用洗耳球?qū)⑷疽捍祫虿⑷扛采w樣本,

室溫孵育 3~5 分鐘

5. 孵育結(jié)束后,取出染se玻片,自來水流水緩慢沖洗玻片 5 分鐘

6. 滴加蘇木素染se 20~30 秒,流水沖凈,待干后鏡檢。建議封片后觀察.

染缸法:

1.蒸餾水稍洗樣本,將玻片放入ai先藍染液的染缸中染se 10~20 分鐘,水洗 30 秒左右;

2.將玻片放入裝有高碘酸的染缸中,室溫孵育 10 分鐘。

3.取出染se玻片,蒸餾水洗玻片 2~3 分鐘。

4.玻片未干透前,將玻片放入裝有雪夫試劑的染缸中,室溫孵育 3~5分鐘。

5.孵育結(jié)束后,取出染se玻片,自來水流水緩慢沖洗玻片 5 分鐘。

6.放入裝有蘇木素染液的染缸中染se 20~30 秒,流水沖凈,待干后鏡檢。建議封片后觀察。

染se結(jié)果

酸性粘液物質(zhì)呈藍se,中性粘液物質(zhì)呈紅se,混合粘液物質(zhì)呈紫紅se,細胞核呈淺藍se

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