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小鼠白細胞介素 4(IL-4)ELISA檢測試劑盒檢測原理

時間:2023/10/16閱讀:458
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小鼠白細胞介素 4(IL-4)ELISA檢測試劑盒檢測原理


檢測原理

試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被小鼠白細胞介素 4(IL-4)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠白細胞介素 4(IL-4)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

樣品收集、處理及保存方法

1.  血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000轉離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2.  血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。

3.  細胞上清液:3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。

5.  保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

試劑盒性能

1.  準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值,大于等于0.9900。

2.  靈敏度:檢測濃度小于 1.0 pg/mL。

3.  檢測范圍:5 pg/mL - 160 pg/mL 。

4.  特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

5.  重復性:板內變異系數小于10%、板間變異系數小于15%。

6.  貯藏:2-8℃,避光防潮保存。

 

7.  有效期:6個月


小鼠白細胞介素 4(IL-4)ELISA檢測試劑盒檢測原理

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