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中級(jí)會(huì)員 | 第10年

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尿素氮檢測(cè)試劑盒測(cè)定原理

時(shí)間:2023/3/21閱讀:1575
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尿素氮檢測(cè)試劑盒測(cè)定原理

 

尿素氮是人體蛋白質(zhì)代謝的主要終末產(chǎn)物。氨基酸脫氨基產(chǎn)生NH3和CO2,兩者在肝臟中合成尿素,每克蛋白質(zhì)代謝產(chǎn)生尿素0.3g。尿素中氮含量為28/60,幾乎達(dá)一半。通常腎臟為排泄尿素的主要器官,尿素從腎小球?yàn)V過后在各段小管均可重吸收,但腎小管內(nèi)尿流速越快重吸收越少,也即達(dá)到了最大清除率。和血肌酐一樣,在腎功能損害早期,血尿素氮可在正常范圍。當(dāng)腎小球?yàn)V過率下降到正常的50%以下時(shí),血尿素氮的濃度才迅速升高。正常情況下,血尿素氮與肌酐之比(BUN/Scr)值約為10.1,高蛋白飲食、高分解代謝狀態(tài)、缺水、腎缺血、血容量不足及某些急性腎小球腎炎,均可使比值增高,甚至可達(dá)20~30;而低蛋白飲食,肝疾病常使比值降低,此時(shí)可稱為低氮質(zhì)血癥。

 

在加熱和強(qiáng)酸條件下,尿素氮與二乙酰肟縮合成紅色的聯(lián)吖嗪稱之Fearon 反應(yīng)。根據(jù)色澤的深淺可以計(jì)算出尿素氮的含量。 

 

標(biāo)本:
草酸鹽、肝素或EDTA 抗凝的血漿。血漿中的尿素氮在室溫下可穩(wěn)定24 小時(shí),而在4~6℃至少穩(wěn)定7 天。尿液用生理鹽水作1:10~1:50 稀釋后與血漿操作相同。若超出線性范圍,須再稀釋。

 

注意事項(xiàng):
1、酸溶液與肟溶液可按等量混勻,用量為2mL,但此混合液只能保存7 天左右。
2、比色前若發(fā)現(xiàn)沉淀,則可3500 轉(zhuǎn)/分離心10 分鐘。
3、顏色太深時(shí),將樣品作適當(dāng)稀釋,結(jié)果再乘以稀釋倍數(shù)。
4、重度脂血標(biāo)本要用除蛋白濾液測(cè)定。
5、試劑4℃保存,有效期一年。
6、本法可以在反應(yīng)完后從反應(yīng)液中吸取適量(200-300μL),加入到96 孔板中(注意不要引入氣泡),酶標(biāo)儀520nm下讀數(shù),吸光值代入公式計(jì)算。

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