植物可溶性糖含量試劑盒檢測原理

測定意義：
糖類物質(zhì)是構(gòu)成植物體的重要組成成分之一，也是新陳代謝的主要原料和貯存物質(zhì)。可溶性糖是指樣品中的還原單糖及在本法測定條件下能水解成還原單糖的蔗糖、麥芽糖和可部分水解為葡萄糖的淀粉。

測定原理：
蒽酮比色法。可用于可溶性單糖、寡糖和多糖的含量測定，具有靈敏度高﹑簡便快捷﹑適用于微量樣品的測定等優(yōu)點(diǎn)。

樣品中可溶性糖的提取：
稱取0.1~0.2g 樣本，加入1mL 蒸餾水研磨成勻漿，倒入有蓋離心管中，95℃水浴10min（蓋緊，以防止水分散失），冷卻后，8000g，25℃離心10min，取上清液于10ml 試管中，用蒸餾水定容至10mL，搖勻備用。

測定步驟
1、分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min 以上，調(diào)節(jié)波長至620nm，蒸餾水調(diào)零。
2、調(diào)節(jié)水浴鍋至95 度。
3、工作液的配制：在試劑一中加入2.5mL 試劑二。充分溶解后使用，如較難溶解，可加熱攪拌；用不完的試劑4℃保存一周；

可溶性糖含量計算：
a.用微量石英比色皿測定的計算公式如下
1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為y = 8.55x - 0.07；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/mL），y 為吸光值。
2、按樣本鮮重計算：
可溶性糖（mg /g 鮮重）= [(ΔA＋0.07) ÷8.55×V1]÷（W×V1÷V2）=1.17×(ΔA＋0.07) ÷W。
3、按樣本蛋白濃度計算：
可溶性糖（mg /mg prot）=[ (ΔA＋0.07) ÷8.55×V1]÷(V1×Cpr)=0.117×(ΔA＋0.07) ÷Cpr。
V1：加入樣本體積，0.04mL；V2：加入提取液體積，10mL； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；
W：樣本鮮重，g。
b.用96 孔板測定的計算公式如下
1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為y = 4.275x - 0.07；x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/mL），y 為吸光值。
2、按樣本鮮重計算：
可溶性糖（mg /g 鮮重）= [(ΔA＋0.07) ÷4.275×V1]÷（W×V1÷V2）=2.34×(ΔA＋0.07) ÷W。
3、按樣本蛋白濃度計算：
可溶性糖（mg /mg prot）= [(ΔA＋0.07) ÷4.275×V1]÷(V1×Cpr)=0.234×(ΔA＋0.07) ÷Cpr。
V1：加入樣本體積，0.04mL；V2：加入提取液體積，10mL； Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；
W：樣本鮮重，g。
注意：最-低檢測限為1mg/g 鮮重或10ng/ mg prot